心脏生化标志物检验.ppt

m-AST诊断心肌梗死的敏感性（为100%）和特异性（为93.5%）均不低于CK-MB（分别为92.8%和93.5% ），且峰值时间较长，可作为诊断心肌梗死的新酶学指标。 心脏手术前的预后判断：术前m-AST值在20U/L以上时，术后死亡率升高；而术前m-AST值在20U/L以下时，术后预后良好。 第三节 心脏蛋白类标志物检验 一、血清肌红蛋白 肌红蛋白，是由一条肽链和一个血红素辅基组成的结合蛋白，是肌肉内储存氧的蛋白质，与氧的亲和力比Hb强，在极低的氧张力情况下，肌肉缺氧时，可释放氧供肌肉收缩的急需。 肌红蛋白是组成骨骼肌和心肌的主要蛋白质，当肌肉损伤时，可以从肌肉组织中漏到循环血液中，使血清肌红蛋白浓度增加，该指标用于判断是否发生肌肉损伤。 测定方法：分光光度法、电泳法、层析法、免疫化学法。 现在普遍采用乳胶增强透射比浊法 特点：灵敏度高、特异性好、测定速度快，适用于各类型生化自动分析仪。 【原理】 Mb致敏乳胶颗粒是大小均一的聚苯丙烯乳胶颗粒悬液，颗粒表面包被有兔抗人Mb抗体。血清样本中的Mb与乳胶颗粒表面的抗体结合后，使相邻的乳胶颗粒彼此交联，发生聚集反应产生浊度。该浊度与样本中的Mb浓度成正比，在570nm处测定吸光度，可计算样本中Mb的浓度。 【试剂与器材】 1.试剂Ⅰ：甘氨酸缓冲液（pH9.0）， NaN31.0g/L 2.试剂Ⅱ：致敏乳胶悬液，兔抗人肌红蛋白IgG 致敏乳胶颗粒， NaN31.0g/L 3.校准品：Mb校准品 4.器材 【实践步骤】 1.测定条件：温度、波长、光径、时间 2.操作 加入物（ml） 测定管 标准管 空白管 试剂Ⅰ 0.2 0.2 0.2 待检血清 0.02 - - Mb校准品 - 0.02 - 蒸馏水 - - 0.02 混匀，37℃保温5min，空白管调零，读取各管吸光度A1 试剂Ⅱ 0.15 0.15 0.15 混匀，37℃保温5min，空白管调零，读取各管吸光度A2 【计算】 ΔA= A2 － A1 采用非线性多点定标模式，以不同浓度标准品的ΔA，绘制标准曲线，用测定管ΔA从标准曲线上查出测定结果。 【参考范围】 健康成人Mb ＜70ug/L 建议各实验室根据自己的条件，建立本地的正常参考范围。 【注意事项】 1.本试剂应避光，于2-8℃可保持1年，-20℃可保持更长时间，但不宜反复冻融。 2.若用半自动、全自动生化分析仪测定应严格按照仪器说明书设定参数进行操作。 3.由于Mb也存在于骨骼肌中，而且仅从肾脏清除，所以急性肌肉损伤、急性或慢性肾衰竭、严重的充血性心力衰竭、长时间休克及各种原因引起的肌病患者、肌肉注射、剧烈的锻炼、某种毒素和药物摄入后，Mb都会升高。 因此，采用血清Mb水平作为诊断AMI的早期指标，仅限于那些没有上述疾病的患者。要注意鉴别Mb升高的真正原因。 【临床意义】 血清Mb增高：见于急性心肌梗死早期、急性肌损伤、肌营养不良、肌萎缩、多发性肌炎、急性或慢性肾功能衰竭、严重充血性心力衰竭和长期休克等。 血、尿中肌红蛋白均升高：见于急性心肌梗死、心绞痛、心源性休克、心肌病、肌疾病(进行性肌营养不良、多发性肌炎、重症肌无力)等。 Mb在AMI中的判断应用 (1)由于Mb的分子量小，可以很快从破损的细胞中释放出来，在AMI发病后1～2小时血中浓度迅速上升，6～9小时达峰值，12小时内几乎所有AMI患者Mb都有升高，升高幅度大于各心 肌酶，因此可以作为AMI的早期诊断标志物。 在AMI发作后一天内即返回基础浓度，当有再梗死时则又迅速上升，形成“多峰现象”。 (2)由于Mb半寿期短(15min)，胸痛发作后6～12小时不升高，有助于排除AMI的诊断，是筛查AMI很好的指标。 (3)由于在AMI后血中Mb很快从肾脏清除，发病18～30小时内可完全恢复到正常水平。故Mb测定有助于在AMI病程中观察有无再梗塞或者梗塞再扩展。Mb频繁出现增高，提示原有心肌梗死仍在。 (4)Mb是溶栓治疗中判断有无再灌的较敏感而准确的指标。 二、肌钙蛋白I测定 肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白，由三个结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC）. 心