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临床检验中丙型肝炎病毒常用检测项目及意义[摘要] 丙型肝炎病毒（HCV）为嗜肝性慢性病毒。HCV感染后，患者的起病和临床症状极不典型，以亚临床感染为多见，容易造成漏诊。丙肝自然转阴率低，治疗效果差，病程迁延，易早期出现肝硬化、肝癌，死亡率较高，因此HCV的检测对丙型肝炎病毒感染的早期诊断和指导临床治疗有重大的意义。目前用于HCV感染诊断的常用主要指标有抗-HCV、HCV-cAg、HCV-RNA、丙肝基因型。现多采用的第三代检测抗-HCVEIA试剂增加了HCV基因组Ns5区表达的蛋白作为抗原，进一步提高了试剂的敏感性，但还存在“窗口期”长、假阳性等问题。HCV核心抗原出现早，检测敏感性好，特异性高，操作简便、快速，对处于HCV感染“窗口期”的个体检测有很大价值。HCV-RNA检测灵敏度高、特异性强，具有早期诊断的意义，是EILSA技术的有力补充，常常作为HCV感染的主要确诊手段。尤其在慢性丙型肝炎治疗中，HCV-RNA定量检测作为最重要的实验室检测指标。丙型肝炎的基因分型在临床上主要是决定干扰素和利巴韦林的疗程和用量。 [关键词] 丙型肝炎病毒；检测；临床检验；临床意义 [中图分类号] R512.6+3 [文献标识码]A [文章编号]1674-4721（2011）05（c）-０14－０2 丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）是丙型肝炎的病原体，曾被称为肠道外传播的非甲非乙型肝炎病毒。1991年被分类为黄病毒科丙型肝炎病毒属。据美国疾病预防与控制中心（CDC）调查发现，丙型肝炎的发病率约7.1/10万，目前全世界的丙型肝炎病毒（HCV）感染者超过1亿人，其中我国约有4 000万，我国HCV的感染率在0.9％～5.1％。丙型肝炎自然转阴率低，治疗效果差，病程迁延，且与肝硬化、肝癌等的发生及发展显著相关。掌握和了解目前临床常用的检测项目的方法和意义，对丙型肝炎的诊断和治疗具有指导性的重大作用。 1 丙肝抗体（抗-HCV）检测 丙肝抗体（抗-HCV）检测，是目前临床上最常用的检测技术。此种检测采用间接酶联免疫法，将已知抗原吸附于固相载体，加入待检标本（含相应抗体）与之结合，洗涤后，加入酶标抗抗体和底物进行测定，是间接检测病毒感染的一种方法。其采用重组或者合成的HCV多肽作为包被抗原，按包被抗原的不同试剂发展经历了3代：第1代试剂盒的包被抗原来自HCV病毒基因组非结构区C100-3，HCV感染3～4个月后可检测到抗-HCV阳性，敏感性较高，达到80％～90％，但假阳性较高[1-3]。第2代试剂除了包被非结构区C100-3抗原外又加入了HCV病毒基因组核心区多肽C22-3和非结构区抗原C33-c，敏感性和特异性明显提高，感染后8～12周即可检测。第3代试剂中包被抗原又增加了NS5蛋白，其敏感性和特异性得到进一步改善。临床实验室对丙型病毒性肝炎的诊断，都是使用第3代抗-HCV ELISA试剂，其包被抗原多，包括HCV-core、NS3、NS4和NS5抗原，大部分为基因工程生产的抗原，特异性和灵敏度达99％[4]。 ELISA法检测抗-HCV具有重复性强，成本低的优点，世界卫生组织认为这种方法适合用于大量样本检测。目前其不仅普遍应用于临床，也用于献血者筛查。但是抗HCV-ELISA存在以下不足：①假阳性问题，HCV感染率10％的人群（如自愿献血者，卫生服务工作者等），抗-HCV ELISA检测假阳性率约35％；免疫系统抑制人群，其检测假阳性率约15％。出现假阳性主要原因包括：血液中存在高浓度非特异性IgG或类风湿因子吸附于固相载体或包被的抗原；受检样本中超氧化物歧化酶的干扰；用于制备试剂的HCV抗原不纯等。②窗口期长。从HCV感染到可检测出抗体（窗口期）通常需平均40多天，抗-HCV 阴性并不能排除携带HCV并且具有传染性的可能，所以检测试剂质量仍需提高和改进。③由于各厂家使用的HCV基因重组抗原的质量和各抗原片段包被比例不同，从而使各厂家试剂的灵敏度和特异性存在一定的差异，导致抗-HCV检测结果的不一致，产生漏检和假阳性。 2 丙肝核心抗原（HCV-cAg）检测 此种检测也采用间接酶联免疫法，利用包被在酶标板固相载体上的单克隆抗体捕获待测样本中的HCV抗原,然后加入与包被抗体识别不同抗原表位的酶标记的不同株单克隆抗体检测。目前已开发出两种HCV核心抗原的ELISA检测试剂：一种是直接检测血清或血浆样品中的游离HCV核心抗原，主要用于血液筛查以缩短窗口期；另一种是检测血清或血浆样品中的总HCV核心抗原。2001年Ortho公司推出了检测HCV 核心抗原（HCV-cAg）ELISA试剂以来，HCV-cAg检测大多以进口试剂为主；国产试剂也在近几年问世，但在临床推广上做得不够。