第3章 基因工程制药 第2节 基因工程药物的分离纯化.ppt

第八节 基因工程药物的分离纯化;;一、建立分离纯化工艺的根据;;二 、分离纯化的基本过程;三、分离纯化的技术;;;⒉目的产物的分离纯化;;分离纯化的方法依赖色谱分离方法 Chromatography;色谱分离方法的分类;色谱系统的基本组成;色谱分离的基本概念; ;阻滞因子Rt 阻滞因子是在色谱系统中溶质的移动速度和标准物（与固定相没有亲和力的流动相 Kd=0）的迁移率之比 其意义在于体现某一种溶质与固定相之间的亲和力大小;洗脱体积 色谱柱中，使溶质从柱中流出所需流动相体积，为洗脱体积 不同的溶质，由于和固定相的亲和力的不同，洗脱体积也有所差异;色谱柱的理论塔板数、塔板高度 反应不同时刻溶质在色谱柱中的分布以及分离度与柱高之间的关系 理论塔板数的计算方法： N---理论塔板数 tR---保留时间 W1/2---半峰宽 Wb---峰底宽度 理论塔???高度：L---柱长 ;;;;常用的离子交换树脂;Source 系列离子交换剂 特点：介质均匀、分辨率高、流速快、反压低 阳离子交换树脂 S系列 阴离子交换树脂 Q系列 MonoBeads 系列离子交换剂（Pharmacia） 特点：介质为亲水性聚醚，具有和Source系列相同的优点，但动态载量更大，寿命更长。 同样分为Q系列和P系列;Mini Q PC 3.2/3: Glutathione synthetase;⑵反相色谱（reversed phase chromatography，RPC）和 疏水色谱（hydrophobic interaction chromatography，HIC）;原理;;30μm;;Mechanism of HIC;;凝胶色谱填料;⑶亲和层析（affinity chromatography，AC）;;;;⑷凝胶过滤;;;Desalting proteins;;⒊非蛋白质杂质的去除;⒊非蛋白质杂质的去除;;四、选择分离纯化方法的依据;;;⒉根据分离单元之间的衔接选择;;⒊根据分离纯化工艺的要求来选择;