Vydac色谱柱注意事项.pdf

色谱柱维护与使用指南：关于Vydac®产品 色谱柱维护与使用色谱柱维护与使用指南指南：关于：关于 Vydac® 产品产品 色谱柱维护与使用色谱柱维护与使用指南指南：：关于关于 产品产品 此指南的目的是提供一些信息来帮助您成功使用 VYDAC® HPLC 柱。在以下部分详细描述了 常规建议与对一些特殊柱的推荐方法： 第一部分 常规建议 第二部分 蛋白质/肽反相色谱柱 第三部分 201TP 特殊反相色谱柱 第四部分 302IC 离子色谱柱 第一部分第一部分 第一部分第一部分 当开始使用您的 VYDAC HPLC 柱时 除去每根柱子两端的柱堵头。我们推荐使用 PEEK 材质的 Finger-Tight™（手拧）接头以确保 1/16”不锈钢管或 PEEK 管与柱的进口端和出口端的紧密相连。这种 PEEK 接头可向格雷斯戴维 森探索科技购买 （例如：Alltech 产品货号 #32233 ）或由您的本地经销商提供。对于2.1mm 内 径和 4.6mm 内径的色谱柱，不锈钢压缩式接头 （10-32UNF,CPI 标准）也能使用。 柱保护 柱的使用寿命能够通过在使用前过滤所有溶剂和样品来延长。我们建议在注射器和柱之间使用 低死体积在线过滤器 （可由格雷斯Vydac 提供：货号 CPF10，每包 10 个）以捕集过滤来自溶 剂、泵、混合室以及注射器中的任何微粒。如果样品存在不溶物质或强吸附物质会阻塞色谱柱 时，我们也建议使用保护柱。大多数VYDAC® HPLC 柱都有相应的柱芯式保护柱。 压力与温度限制 VYDAC® 硅胶基 HPLC 柱能够在 0-60°C 及压力不超过 5000psi(335bar)的情况下使用。 VYDAC® 硅胶基反相色谱柱的典型背压是： 粒径粒径 (µm) 柱规格柱规格 (mm) 流速流速(mL/min.) 典型背压典型背压 ( 乙腈乙 :水水 50:50) 粒径粒径 柱规格柱规格 流速流速 典型背压典型背压 乙乙 水水 5 2.1 x 250 0.2 1000 – 1800 psi 5 4.6 x 250 1.0 1000 – 1800 psi 5 4.6 x 150 1.0 600 – 1200 psi 5 10 x 250 5.0 1000 – 1800 psi 10 4.6 x 250 1.0 500 – 1000 psi 10 10 x 250 5.0 500 – 1000 psi 10 22 x 250 25 500 – 1000 psi 如果您的 VYDAC 色谱柱碰到麻烦时 HPLC 柱会被某些吸附能力强的样品成分污染，导致柱的背压升高或者分离度的损失。当色谱 柱看起来像是被污染时： 色谱柱维护与使用指南：关于Vydac®产品 1. 如果背压过高，从系统上取下色谱柱并且运行泵以确保背压是由色谱柱引起的而不是 HPLC 系统自身产生的压力。 2. 如果是色谱柱导致背压过高，那么将色谱柱逆向冲洗以尝试冲洗除去入口筛板处的污染 物。反向冲洗时，先由低流速开始 （内径为4.6mm 的色谱柱用 0.5mL/min 的流速）持 续 10-15 分钟，然后再将流速增大至 1.5-2.0mL/min （内径4.6mm 的色谱柱）。 3. 清洗色谱柱可以使用 10-20 倍柱体积的强洗脱液 （反相色谱柱用高浓度有机溶剂；