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血管内皮细胞生长因子165基因转染人骨髓间充质干细胞构建组织工程皮肤的实验研究的开题报告

一、研究背景和意义

组织工程皮肤是一种新型的皮肤修复技术，可缓解大面积皮肤缺损引起的疼痛和感染等症状，适用于烧伤、创伤、先天畸形等各种皮肤缺损的修复。目前的组织工程皮肤常常会存在成活率低、功能差等问题，而干细胞治疗作为一种新型的修复手段被广泛研究。骨髓间充质干细胞（BMSCs）具有较强的增殖和分化潜能，以及良好的免疫规避性和生物相容性，是一种理想的干细胞种类。血管内皮细胞生长因子165基因（VEGF165）能够促进血管生成和组织修复，已被广泛应用于组织工程领域中。因此，本研究旨在探究VEGF165基因转染BMSCs在构建组织工程皮肤中的应用效果，为进一步优化组织工程皮肤的实现提供参考。

二、研究内容和方法

1.研究内容

（1）测定VEGF165基因转染对BMSCs增殖和分化的影响；

（2）构建VEGF165基因转染BMSCs的组织工程皮肤模型；

（3）评价VEGF165基因转染BMSCs对组织工程皮肤修复效果的影响。

2.研究方法

（1）以小鼠BMSCs为材料，利用质粒转染方法将VEGF165基因转染至BMSCs中，利用MTT法和实时荧光定量PCR法检测转染效果和对BMSCs增殖和分化的影响；

（2）将VEGF165基因转染BMSCs与生物支架结合，构建3D组织工程皮肤模型，利用形态学、免疫组织化学、光镜和电镜等多种方法检测皮肤组织结构和生物学性质；

（3）在小鼠模型上进行VEGF165基因转染BMSCs和未转染BMSCs的组织工程皮肤治疗实验，通过观察皮肤修复效果和皮肤组织学检测，评价VEGF165基因转染BMSCs对组织工程皮肤修复效果的影响。

三、预期结果和应用价值

预计本研究能够成功构建VEGF165基因转染BMSCs的组织工程皮肤模型，并验证VEGF165基因转染BMSCs对组织工程皮肤修复效果的提升，优化组织工程皮肤的实现方案，为临床应用提供理论和实验依据。本研究结果可为组织工程皮肤的进一步发展和完善提供新思路和新的研究方向，也可为其他组织工程领域中相关干细胞的应用提供参考。