《微生物培养基》课件.ppt

*************************************麦康凯琼脂选择性机制含胆盐和结晶紫，抑制革兰氏阳性菌和某些敏感的革兰氏阴性菌鉴别原理含乳糖和中性红，区分乳糖发酵菌和非发酵菌主要用途分离肠道样本中的肠杆菌科细菌并进行初步鉴定结果解读乳糖发酵菌形成粉红色菌落，非发酵菌形成无色透明菌落麦康凯琼脂是临床微生物学中最常用的选择性鉴别培养基之一，特别适用于肠道和尿路样本的病原菌分离。其组成包括胰蛋白胨、乳糖、胆盐、中性红、结晶紫和琼脂等。胆盐和结晶紫抑制多数革兰氏阳性菌的生长，使革兰氏阴性菌，尤其是肠杆菌科细菌能够优先生长。在麦康凯琼脂上，能发酵乳糖的细菌（如大肠杆菌、克雷伯菌）会产生酸，使pH降低，中性红指示剂变为粉红色，因此这些菌形成粉红色至红色的菌落；而不发酵乳糖的细菌（如沙门氏菌、志贺氏菌、假单胞菌）则形成无色或淡黄色透明菌落。通过观察菌落颜色和形态，可对肠道病原菌进行初步分类和鉴定。沙布罗葡萄糖琼脂基本组成由胨类、葡萄糖和琼脂组成，通常添加抗生素如氯霉素来抑制细菌生长目标微生物专为真菌（酵母菌和丝状真菌）的分离和培养而设计pH特性pH值约5.6，微酸性环境有利于真菌生长，同时抑制多数细菌临床应用用于皮肤、指甲、头发等样本中真菌病原体的分离鉴定沙布罗葡萄糖琼脂（SabouraudDextroseAgar，SDA）是真菌学中最基础和广泛使用的培养基。它提供了丰富的碳源（葡萄糖）和氮源（蛋白胨），特别适合真菌的生长需求。由于其微酸性的pH环境和可添加的抗生素，SDA对大多数细菌有抑制作用，使真菌能够优先生长，便于从混合感染样本中分离真菌。在实际应用中，SDA常用于各种临床样本的真菌检测，如皮肤癣菌、念珠菌和曲霉菌等的分离。不同真菌在SDA上可形成具有特征性的菌落，如酵母菌通常形成光滑湿润的圆形菌落，而丝状真菌则形成蓬松、绒毛状或粉末状的菌落，这些特征有助于真菌的初步鉴定。马铃薯葡萄糖琼脂基本组成马铃薯提取物（200g/L原料）葡萄糖（20g/L）琼脂（15-20g/L）pH值调至5.6±0.2培养特性促进真菌孢子形成增强色素产生支持良好的菌丝体发育适合观察真菌形态结构应用领域真菌分类和鉴定真菌形态学研究真菌保存和传代食品和环境真菌污染检测马铃薯葡萄糖琼脂（PotatoDextroseAgar，PDA）是一种广泛用于真菌培养的半天然培养基。马铃薯提取物富含淀粉、维生素和微量元素，为真菌生长提供了良好的营养基础；高含量的葡萄糖则提供了充足的碳源，促进真菌的快速生长和孢子形成。与沙布罗葡萄糖琼脂相比，PDA在促进真菌形态结构发育和色素产生方面表现更佳，因此特别适合用于真菌的分类和鉴定研究。在食品微生物学和环境微生物学中，PDA常用于检测样品中的霉菌和酵母菌污染。制备PDA时需注意控制pH值和灭菌条件，以避免马铃薯成分的变性和琼脂的过度水解。培养基的选择原则1目标微生物特性考虑其营养需求、生长条件和生理特点实验目的分离、鉴定、计数或代谢研究等不同目的样品性质样品来源、复杂程度和可能的干扰因素实验方法培养条件、时间和后续处理要求资源条件实验室设备、技术条件和经济因素选择合适的培养基是微生物学实验成功的关键之一。理想的培养基应能满足目标微生物的所有生长需求，同时实现实验的特定目的。在实际工作中，培养基的选择通常需要综合考虑多方面因素，并根据具体情况进行权衡。对于复杂样品的微生物分析，常需要使用多种培养基进行配合，例如在病原菌分离中，可能需要依次使用富集培养基、选择性培养基和鉴别培养基。此外，还应考虑培养基与其他实验条件（如温度、气体环境、培养时间等）的匹配性，以获得最佳实验效果。培养基对微生物的选择作用营养选择通过提供特定的碳源、氮源或生长因子，促进能利用这些物质的微生物生长，同时限制其他微生物。例如，柠檬酸盐培养基只含有柠檬酸钠作为唯一碳源，只有能利用柠檬酸的细菌才能生长。另一个例子是缺乏特定氨基酸的合成培养基，可用于筛选具有相应氨基酸合成能力的微生物。生理选择通过调整培养基的物理化学条件如pH值、盐浓度、渗透压等，创造适合特定微生物但不利于其他微生物的环境。例如，pH9.6的碱性培养基用于分离嗜碱菌；7.5%NaCl的高盐培养基有利于嗜盐菌的生长。温度、氧气条件等培养参数也可与培养基协同作用，增强选择性。如低温培养有利于嗜冷菌的分离。培养基的选择作用还可以通过添加特定的抑制剂或抗生素来实现，这些物质对不同微生物的抑制效果不同，可用于选择性地分离特定微生物。常用的抑制剂包括染料（如结晶紫、甲基紫、碱性品红等）、胆盐