UVvis分光光度计.ppt

J. Cao (IHEP) J. Cao 2005-9-15 UV-vis分光光度计仪器研究 曹俊 分光光度计原理 Pgeneral 1901 UV-vis 示意图 （光路是猜的） 测量方法 设定扫描参数：步长，带宽，响应时间 先对空白样品与参比物扫描基线 再对被测样品与参比物测量（各比色皿之间可能有差异） 玻璃的反射 比色皿 空白样品 如果空白样品采用空池，注入液体后两个内表面的反射光大大减少(~8%)，而且不同波长处变化不同(Abs~0.002) 液体的折射率与温度有关 液闪/十二烷（十二烷） LS与十二烷反射光强差 ~0.06% 基线 值得进一步研究 反射率的影响 用空气做参比（两个大数相减）是否影响精度？ 电压稳定性的影响 是否需要遮光措施？ 可重复性 白油/十二烷（十二烷） * Sep. 15, 2005 PMT 比色皿 扇形镜 2000转/分钟 光源 氘灯+ 钨灯 波长切换点可设置，300-390nm PMT QE测量装置 半透半反膜分光得到的光谱不一样，在这里不会发生 厂方的建议：使用净化稳压电源、预热两小时。 光栅 光源 被测样品与参比物的差 减去 空白样品与参比物的差（基线） 2.28% 1.14% 0.92% 0.69% 0.46% 0.23% 光强衰减 4.3 0.01 8.7 10.9 14.5 21.7 43 λ (m) 0.005 0.004 0.003 0.002 0.001 Abs 对光强的影响需要知道到1%的精度 一次测量一般需要用三个样品来表示 被测样品/空白（参比） 四层空气与玻璃的反射 (16%) 800nm n=1.511 ? Abs=0.0735 600nm n=1.516 ? Abs=0.0746 400nm n=1.530 ? Abs=0.0780 Example 折射率的虚部贡献可忽略 比较液闪吸收曲线与玻璃吸收曲线： 可以采用玻璃比色皿 但读数在300nm以下没有意义 液闪/十二烷（十二烷） 空池/空气（空气） 空池/空气（空气） 最好空白样品与被测样品的折射率相同，这样反射（强度与波长依赖）相同。参比物可能不重要，如果不影响光度精确度。 如果十二烷+三甲苯稳定，可用相同比例的十二烷+三甲苯做空白，用来监测掺钆液闪。或者用纯十二烷。 无法得到衰减长度的绝对值 需要仔细研究各材料的折射率变化并修正 两个大数相减得到一个小数，精度未知（需实验） 600nm: 0.0098 430nm: 0.0101 十二烷折射率1.4216 均三甲苯 1.4994 空气（空气） 十二烷（十二烷） 十二烷（十二烷） 5、 杂散光： 0.015%T 8、 光度准确度：±0.002Abs 9、 光度重复性：0.001Abs(0～0.5Abs) 10、基线平直度：±0.001Abs * *