LS_T 6127-2017粮油检验 粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定 超高效液相色谱法.pdf

ICS 67.040x 11LS中华人民共和国粮食行业标准LS/T6127—2017粮油检验粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定超高效液相色谱法Inspection of grain and oils—Determination of deoxynivalenol in grains-Ultra-high performance liquid chromatography2017-10-27发布2017-12-20实施国家粮食局发布 LS/T言本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草，本标准由国家粮食局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会(SAT/TC270)归口，本标准起草单位：国家粮食局科学研究院、吉林省粮油卫生检验监测站、安徽国家粮食质量监测中心、北京农业质量标准与检测技术研究中心，本标准主要起草人：谢刚、李丽、黎睿、叶金、王松雪、徐振斌、胡斌、崔华、吴字、辛媛媛、随安祥。 LS/T油检验粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定超高效液相色谱法1范围本标准规定了粮食及其制品中股脱氧雪质谦刀菌烯醇超高效液相色谱法测定的原理、试剂与仪器设备、分析步骤、结果计算等内容。本标准适用于粮食及其制品中脱氧雪腐银刀菌烯醇的测定，本标准方法脱氧雪腐糖刀菌烯醇的检出限为0.05mg/kg，定量限为0.15mg/kg.22规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备GB/T 5491粮食、油料检验扦样、分样法GB/T 6682分析实验室用水观格和试验方法3原理经过水提取试样中的脱氧需质镶刀菌烯醇，免疫亲和柱净化、富集后，用超高效液相色谱紫外检测器测定，外标法定量。4试剂与仪整设备除另有规定外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中一级水的要求。4.1试剂4.1.1甲醇(CH,OH)：色谱纯，4.1.2乙晴(CH,CN)：色谱纯。4.1.3案乙二醇（相对分子量8000)分析纯，4.1.4乙睛+水（(10+90)：取10mL乙(4.1.2)加人90mL水。其他试剂符合GB/T602的要求，4.2标准品4.2.1脱氧雪腐谦刀菌烯醇标准品：纯度≥99%；或经国家认证并投予标准物质证书的标准物质。4.2.2标准储备液：准确称取脱氧雪腐镶刀菌烯醇标准品（4.2.1)1mg(准确至0.01mg），用乙肺溶解并定容至10mL，配成浓度为100mg/L的标准储备液，一20C避光保存。4.2.3标准工作液：根据使用需要，准确移取适量的脱氧雪质糖刀菌醇标准品储备液（4.2.2)，用流动相定容至10mL，分别配成浓度为0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、5mg/L的标准工1 LS/T液。4C避光密封保存，有效期一周，4.3材料与仪器设备4.3.1脱氧雪腐镶刀菌烯醇免疫亲和柱。4.3.2定性滤纸：12cmWhatman4号，或性能相当者，4.3.3玻璃纤维滤纸：9cmWhatmanGF/A，或性能相当者。4.3.4滤膜：0.22μm孔径，有机相，4.3.5注射器：10mL，4,3.6离心管：50mL，4.3.7三角瓶：250mL。4.3.8量筒，4.3.9高速粉碎机。4.3.10高速均质器：转速6500r/min~24000z/min。4,3,11氮气吹干仪，4.3.12天平：感量0.1g和0.01mg。4,3.13离心机：转速≥5000r/min，4.3.14调速多用振荡器（振荡频率≥150次）。4.3,15空气压力泵。4.3.16试验筛：1mm孔径。4.3.17液相色谱柱：C18柱（柱长50mm或100mm，柱内径2.1mm，填料粒径1.7μm），或性能相当者。4.3.18超高效液相色谱仅：包括超高效液相色谱仪、超高压液相色谱仪和超高速液相色谱仪，配备PDA或紫外检测器和数据处理系统。色谱参考条件：色谱柱：C18柱(4.3.17)，灌动相A乙晴(4.1.2)，B，水；等度洗脱，A：B=10：90流速：0.1mL/min,紫外检测波长，218nm。进样量：10μL。柱温，25℃.5分析步骤5.1扦样与分样按GB5491执行，在采样过程中，注意防止样品污染。5.2样品制备5.2.1提取样品用高速粉碎机(4.3.9)粉碎，过1mm孔径试验筛（4.3.16)，混合均勾后，取有代表性样品不少于500g，供检测用。准确称取25g(m，精确到0.1g)充分混匀的试样，置于均质杯或250mL三角瓶中，加入5.0g案乙二醇(4.1.3)和100mL(V,)水，高速均质提取2min，或者使用调速多用报荡器