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第六章 发酵过程中的通气和搅拌
葡萄糖在生物体内的有氧氧化
C6H12O6+6O2→6H2O+6CO2+能量,1mol(180克)葡萄糖完全水解需要6mol(192克)氧,微生物只能利用溶解在水中的葡萄糖和氧,葡萄糖的溶解度70%(W/V)。而一个大气压25度下,氧的溶解度6.4mgO2/L,如生产中的需氧量按20-50mmolO2/L.H计算的话,培养液中的溶解氧只能维持微生物正常的生命活动20-50秒。
第一节 发酵过程中氧的需求
一 微生物对氧的需求
氧-细胞组成。产物组成。代谢所需元素。好气微生物的最终电子受体。通过氧化磷酸化为生物体提供能量
摄氧率:单位体积培养液每小时消耗的氧 mmol(O2)/L.h
呼吸强度:单位干菌体每小时消耗氧量mmol(O2)/g(干菌)。
在溶氧浓度低的情况下,呼吸强度随溶解氧的浓度的增加而增加,当溶解氧达到一定的值以后,呼吸强度就不再变化。此时的溶解氧浓度称之为呼吸临界氧浓度。C临界,在抗生素的发酵过程中,微生物生长阶段和产物代谢阶段的C是不同的。多数品种的C长临C合临
二 氧在液体中的溶解特性
三 影响微生物需氧量的因素
(一)微生物的种类和生长阶段 菌体处于对数生长阶段的呼吸强度较高,生长阶段的摄氧率大于产物合成的摄氧率。
(二)培养基的组成 一般来说,碳源浓度在一定范围内,需氧量随碳源浓度的增加而增加。
(三)培养液中溶解氧浓度CL的影响 当培养液中的溶解氧浓度CL高于菌体的C长临时,菌体的呼吸就不受影响,如果CL低于C长临时,则代谢产生了变化。
(四)培养条件 一般说来,温度越高,营养成分越丰富,其呼吸强度的临界值也增加
(五)二氧化碳的影响 已知在相同条件下,二氧化碳在水中的溶解度是氧溶解度的30倍,所以要及时把二氧化碳排除罐内。
第二节 氧在溶液中的传递
一 氧传递的阻力 在需氧发酵中,气态氧必须先溶解于培养液中,然后才能传递至细胞表面,再经过简单的扩散作用进入细胞内,参与菌体内的氧化等生化反应。
二 氧的传递方程式
第三节 发酵液的流变学
微生物的发酵液是由三相体系组成,液相固相气相,在液相中有可溶性营养物质、盐类、代谢产物。固相中包含菌丝体或菌丝团,不溶性的营养物质。气相中包含无菌空气、二氧化碳。
一 液流类型
二 发酵液的流变学
第四节 影响供氧的因素
一 影响氧传递推动力的因素
1 提高饱和溶氧浓度的方法:降低培养温度、降低培养基的营养物质的含量、提高发酵罐内的氧分压。空气通过装有吸附氮气的介质,减少氮含量,相对提高氧分压。
2 降低发酵液中的氧溶解浓度。
二 影响液相体积氧传递系数的因素
1 搅拌效率的影响 搅拌的作用:使发酵罐中的温度和营养物质均一,三相均衡。把空气分割成小气泡,增加气液接触面积,强化发酵液的湍流程度,减少菌丝结团,尽快排除废气。
2 空气流速 气泛现象:特定条件下,通入发酵罐内的空气流速达到一定的值时,使搅拌功率下降,当空气流速再增加时,搅拌功率不再增加,此时的空气流速称为气泛点。
3发酵液理化性质的影响
发酵过程的控制
微生物的发酵类型
投料方式:分批、补料、连续发酵
是否需氧:需氧、厌氧发酵
菌体生长与碳源消耗及产物合成之间的关系:生长、部分、非偶联
生长偶联型发酵:产物是直接源于产能的初级代谢,菌体生长、糖的分解代谢和产物形成几乎是平行的,因而菌体生长和产物形成期并不是分开的。
部分生长偶联:两个阶段(生长、合成)比较明显
非生长偶联:第一阶段菌体生长占主体,菌体生长速率和基质消耗速率基本同步,第二阶段以产物合成为主,只有少量的菌体产生和少量基质的消耗。
发酵过程的工艺控制
一 物理参数
1温度:全程不同阶段的温度
2压力: 正压保持无菌,同时与氧、二氧化碳的溶解度有关。0.02-0.05MPa
3 搅拌转速
4 搅拌功率kW/m3
5 空气流量 指每分钟内每单位体积发酵液通入空气的体积。一般控制在0.5-1.5v/v.min
6 粘度
二 化学参数
1 PH
2 基质浓度(糖、氮、磷)
3 溶解氧浓度(mmol/l mg/l)
4 氧化还原电位
5 产物浓度
6 废气中氧 二氧化碳的含量
三 生物参数
1 菌体浓度
2 菌丝形态
第三节 发酵过程中的代谢变化
一 初级代谢产物发酵的代谢变化
初级代谢:生物细胞在生命活动中进行的与菌体的生长、繁殖相关的一类代谢活动。基本特征:菌体进入发酵罐后经过生长、繁殖,并达到一定的浓度,出项延迟期、对数生长期、静止期、死亡期。用静止期的菌种接种,既是能生长也会出现延迟期。
二 次级
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