Ki67启动子调控荷载双基因RNA干扰的条件增殖腺病毒的构建的开题报告.docx

Ki67启动子调控荷载双基因RNA干扰的条件增殖腺病毒的构建的开题报告 1. 研究背景与意义： Ki67是一种广泛表达于所有增殖细胞的细胞核蛋白，与细胞周期的各个阶段密切相关。它可以作为增殖指标，在癌症等疾病的诊断和治疗中具有重要的价值。为了进一步探究Ki67的调节机制，本研究打算采用基因技术手段构建一种载有Ki67启动子的双基因RNA干扰的条件增殖腺病毒，以用于检测Ki67启动子的调控效应。本研究旨在为深入研究Ki67的调控机制提供新的研究思路和方法。 2. 研究内容和思路： （1）构建载有Ki67启动子的条件增殖腺病毒载体：首先设计合适的Ki67启动子序列，将其克隆到干扰载体中。随后，选取合适的基因组片段，包括p19、p39、p40和p41，将其与干扰载体进行重组，构建Ki67启动子调控荷载双基因RNA干扰的条件增殖腺病毒载体。 （2）体外细胞转染及检测：将构建好的条件增殖腺病毒载体用于体外细胞转染实验，接种适当的培养基和细胞系，观察细胞增殖及Ki67启动子的表达情况，并比较不同组间的差异。 （3）体内靶向实验：将构建好的条件增殖腺病毒载体用于动物实验中，接种适当的动物模型，观察细胞增殖及Ki67启动子的表达情况，考察Ki67启动子调控胰腺癌等肿瘤细胞增殖的作用。 3. 预期成果： 本研究预期构建一种可靶向Ki67启动子的双基因RNA干扰的条件增殖腺病毒载体，实现对Ki67启动子调控机制的探究。通过体内外实验，验证荷载Ki67启动子的干扰载体的调控效果和干扰效率，并为研究肿瘤细胞的增殖机制提供科学依据和新的研究思路。