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人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)酶联免疫分析(ELISA).PDF

发布:2017-06-13约1.26万字共8页下载文档
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IgM(HCV-IgM) IgM(HCV-IgM) 人丙型肝炎IIggMM((HHCCVV--IIggMM))酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于检测人血清,血浆, 细胞 培养液及相关液体样本中丙型肝炎IgM(HCV-IgM)水平,感染人的血液学诊断。 实验原理: 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)。 用纯化的人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中丙型肝炎 IgM(HCV-IgM)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP 标记的丙型肝炎 IgM(HCV-IgM)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显 色。TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF 值相比较,从而判定标本中人丙型肝炎 IgM(HCV-IgM)的存在与否。 试剂盒组成: 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存 说明书 1 份 1份 封板膜 2片(48) 2 片(96) 密封袋 1 个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 阴性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存 阳性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 (20ml×20 倍)×1 瓶 (20ml×30 倍)×1 瓶 2-8℃保存 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次 离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞 1 浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分 钟左右(20
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