DNA重组技术的基本工具.pptx
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课标要求:现代生物科技专题
拓展学生的生物科技视野,增强学生的科技意识,为学生进一步学习生物学类专业奠定基础。
;现代生物科技专题;; 本模块知识内容的构建顺序:
基因工程 细胞工程 胚胎工程 生态工程
;专题一 基因工程;科技探索之路;科技探索之路;科技探索之路;科技探索之路;基础理论和技术发展催生了基因工程; 基因工程,又叫DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传特性。;基因工程的别名;每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4到5g。;某种药物蛋白的基因;准确切割DNA的工具(“分子手术刀”)
——限制性内切酶; DNA重组技术的基本工具;学习目标;⒈自然界是否存在一种生物的DNA进入另一生物的情况?
2.单细胞生物并没有在进化中灭绝,有何保护机制?;2.为什么限制酶和DNA连接酶在微生物中能够分离到,而高等植物和动物中没有?;为什么限制酶不能将自己的DNA分子剪切掉?;限制性核酸内切酶——“分子手术刀”;限制性核酸内切酶——“分子手术刀”; T;;限制性核酸内切酶——“分子手术刀”;限制酶的识别序列;限制性核酸内切酶——“分子手术刀”; 被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,它们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。;;……GAATTC……
……CTTAAG……;“分子缝合针” —— DNA连接酶; 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,; ;DNA复制;比较几种酶的作用;; 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去。能将外源基因送入细胞的工具就是运载体。;⒈运载体需要的条件:
⑴有1~多个限制酶切点
⑵对受体细胞无害
⑶导入基因能在受体细胞中复制、表达
⑷有某些标记基因,便于筛选
⒉常用运载体:
⑴细菌的质粒
⑵λ噬菌体的衍生物或某些动植物病毒;常用的载体:质粒;限制性核酸内切酶(分子手术刀); 课下制作:
使用EcoRI酶、E.coliDNA连接酶形成的DNA重组的模型 ,下节课展示。;…CTGCA
…G?;习题:已知标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素的基因,现探讨某细菌的质粒中有无标记基因或标记基因是什么?请设计实验、预期实验结果,并得出相应的实验结论;质粒的构建与改造
1)删除不必要的DNA区域,缩小分子量,提高外源DNA片段装载量。
2)灭活某些质粒的编码基因。
3)加入易于识别的选择标记基因。
4)加入特殊的基因表达调控元件。 ;1、关于限制酶的说法中,正确的是( )
A.限制酶是一种酶,只识别GAATTC碱基序列
B.EcoRI切割的是G—A之间的氢键
C.限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA
D.限制酶只存在于原核生物中;2、DNA连接酶催化的反应是( )
A.DNA复制时母链与子链之间形成氢键 B.黏性末端碱基之间形成氢键
C.两个DNA片段黏性末端之间的缝隙的连接
D.A、B、C都不正确;3、作为基因的运输工具——载体,必须具备的条件及理由是( )
A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因
B.具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达
C.具有某些标记基因,以便为目的基因的表达提供条件
D.能够在宿主细胞中复制并稳定保存,以便于进行筛选;4.基因工程常用的受体细胞有( )
(1)大肠杆菌 (2)枯草杆菌
(3)支原体 (4)动植物细胞
A. (3)(4) B. (1)(2)(4)
C. (2)(3)(4) D. (1)(2)(3)
;3.不属于质粒被选为基因运载体的理由是
( )
A、能复制
B、有多个限制酶切点
C、具有标记基因
D、它是环状DNA;4.以下说法正确的是
A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
B、质粒是基因工程中唯一的运载体
C、运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接
D、DNA连接酶使黏性末段的碱基之间形成氢键;9、青少年是一个美好而又是一去不可再得的时期,是将来一切光明和幸福的开端。。8月-218月-21Wednesday, August 25, 2021
10、人的志向通常和他们的能力成正比例。18:28:1418:28:1418:288/25/
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