原儿茶酸促进人脂肪干细胞体外增殖的研究-生物化学与生物物理进展.PDF

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2008, 35(10): 1168~ 1174 儿茶酸促进人脂肪干细胞体外增殖的研究* 1) 1)** 1) 1) 1) 2) 王晗 刘天庆 朱艳霞 关 水 马学虎 崔占峰 1) 2) ( 大连理工 学干细胞与组织工程研发中心，大连 116024 ；Dep artment of Engineering Sc ience, Oxf ord University, Oxf ord OX 1 3PJ, UK) 摘要 为了寻找能够促进干细胞增殖的药物，观察了中药益智仁(A lp inia oxyp hylla) 中提取的原儿茶酸对人脂肪干细胞体外增 殖的影响，并对其作用机制进行了初步的探讨 人脂肪干细胞能在体外分化为神经元样细胞，并对凋亡的PC-12 细胞起到保 护作用 原儿茶酸能够促进人脂肪干细胞的增殖，且呈现明显的剂量依赖性和时间依赖性 流式细胞术检测细胞DNA 含量 的结果显示，原儿茶酸 理组细胞S 期所占比例明显增加，其中，1.5 mmol/L原儿茶酸 理组细胞S 期所占比例与对照组相 比增加2 倍以上 同时，该组细胞G2/M 期所占比例明显增加，G0/G1 期所占比例明显下降 蛋白质免疫印迹结果显示， 1.5 mmol/L原儿茶酸 理组细胞周期素D 1(cyclin D 1)的表达明显升高 cyclin D 1-siRNA 转染显著抑制了原儿茶酸对人脂肪干 细胞体外增殖的促进作用 流式细胞术检测细胞表面标志物，成骨诱导和脂肪诱导的结果显示，原儿茶酸 理后，人脂肪干 细胞仍保持间充质干细胞多分化潜能的特性 上述结果提示，原儿茶酸有可能在人脂肪干细胞介导的干细胞移植治疗中发挥 作用 关键词 原儿茶酸，脂肪干细胞，增殖，细胞周期，细胞周期素D 1(cyclin D1) 学科分类号 Q253，R961 脂肪干细胞是脂肪组织中一类多能干细胞，其 参、芙蓉(Hibisc us sabdariffa L.) 、益智仁(A lp inia 在体内外特定的条件下，可分化形成多种细胞类 oxyp hylla) 中的有效活性成分，具有抗氧化、抑制 型，如脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、神经细 肿瘤细胞生长和诱导HL60 白血病细胞、HepG2 肝 [1] [15～19] 胞、肌肉细胞等 由于脂肪干细胞易于分 ，且 癌细胞凋亡的作用 但其对干细胞增殖的影响 [1, 2] 可以在体外条件下大量扩增和长期稳定培养 ， 未见报道 本研究观察了人脂肪干细胞体外条件下 因此，可以作为组织再生工程理想的细胞源 向神经细胞的诱导分化和对PC- 12 细胞的凋亡保护 在细胞移植组织重建的过程中，需要为新组织 作用，以及益智仁中提取的原儿茶酸对人脂肪干细 的形成提供足够的细胞来源 但是，多数情况下， 胞体外增殖的影响，并对原儿茶酸的作用机制进行 [3, 4] 移植的细胞不能很好地存活和增殖 ，因此，找 了初步的探讨 到合适的药物或生长因子等来促进移植的干细胞增 1 材料与方法 殖对于提高干细胞移植治疗的效果至关重要 研究发现，一些生长因子( 如表皮生长因子 1. 1 试剂 [5～7]