系统性红斑狼疮患者血浆白细胞介素-35的变化及其临床意义.doc
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系统性红斑狼疮患者血浆白细胞介素-35的变化及其临床意义
邱贝芬1 欧阳涵1 石永兵1(通信作者) 刘志纯2 沈华英1 施晓松1 王峙1 冯胜1
(1苏州大学附属第二医院肾内科 215004;2苏州大学附属第二医院风湿免疫科 215004)
【摘要】 目的 检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血浆白细胞介素(IL)-35水平,探讨其在SLE患者血浆中的变化及与疾病活动性的关系。方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测30例SLE患者及15名健康体检者血浆IL-35水平,比较其在各组中的差异及其与SLE患者部分临床指标的相关性,两组间比较用独立样本t检验,三组间比较采用方差分析,与临床资料的相关分析采用非参数的spearmen的相关分析。 结果 活动期SLE患者血浆IL-35水平(10.7plusmn;3.9)pg/ml低于健康对照组(55.2plusmn;15.6)pg/ml (Plt;0.01)及SLE稳定组(25.3plusmn;8.1)pg/ml (Plt;0.05),稳定组亦低于健康对照组 (Plt;0.05)。SLE患者血浆IL-35水平与抗核抗体(ANA)、抗dsDNA、红细胞沉降率(ESR)、24h尿蛋白定量、SLE活动指数(SLEDAI)呈负相关,与补体(C)3呈正相关。结论 SLE患者血浆IL-35水平降低,与疾病活动性相关,提示IL-35在SLE的进展中可能发挥重要作用,并可作为反映SLE活动性的指标。
【关键词】系统性 红斑狼疮 IL-35 酶联免疫吸附试验
系统性红斑狼疮(SLE)是一种多系统、多器官受累的自身免疫性疾病,在SLE的发病中,免疫紊乱是重要的促发因素,无论是细胞免疫还是体液免疫,细胞因子在其中均起着重要的作用,因此对细胞因子的研究将有助于更好的阐明SLE的发病机制。IL-35是新近命名的具有抗炎作用的细胞因子,是调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)发挥其抑制作用的关键分子[1],Niedbala等[1]和Collison等[2]学者证实Treg表达的IL-35通过扩增Treg细胞分化及增殖、抑制Th17细胞亚群的产生及其细胞因子的分泌从而在维持自我耐受,防止自身免疫病方面发挥重要作用。目前IL-35在SLE患者体内表达及分泌有无异常及其与SLE严重程度的关系在国内外尚无报道。
本实验将通过测定SLE患者及健康体检者血浆IL-35水平,观察其含量的差异并探讨其临床意义。
1 研究对象与方法
1.1研究对象
收集2012年7月至2013年2月于苏州大学附属第二医院肾内科住院的系统性红斑狼疮患者20例,按SLE活动指数[3](SLEDAI)分为活动组(ge;10分)和稳定组(lt;10分)。活动组15例,男性1例,女性14例,平均年龄(33plusmn;13岁),所有患者均为初发,并未接受激素或是免疫抑制剂治疗。稳定组15例,男0例,女15例,平均(35plusmn;11岁),长期口服甲泼尼龙4~8mg/d治疗,病情稳定已超过1年。正常对照组15例,男2例,女13例,平均年龄(30plusmn;10岁),所有患者均符合1997年美国风湿病学院(ACR)修订的SLE诊断标准,全部患者均排除急性感染和其它风湿性疾病,对照组无自身免疫疾病史,SLE患者研究遵循的程序符合医学伦理委员会所制定的伦理学标准,并获得该委员会的批准,标本的采集均在获得受试者知情同意后完成。
1.2试验方法
1.2.1标本采集及血浆IL-35测定:清晨于无菌条件下采集SLE患者及健康体检者空腹静脉血各3ml,采用双抗体夹心ELISA测定,全血以3000r/min离心10min,吸出上层血浆放置于-80℃冰箱内保存待测,IL-35的ELISA试剂盒购自美国Groundwork Biotechnology Diagnosticate公司,具体操作严格按照试剂盒内说明进行。
1.2.2血清学指标检测:魏氏法检测ESR,散射免疫比浊法检测补体,ELISA法检测抗核抗体。
1.3 统计学处理
统计学分析采用SPSS13.0软件,定量资料以x-plusmn;s描述,各组数据符合正态分布,两组之间的比较用独立样本t检验,三组之间的比较采用方差分析,抗核抗体滴度为等级资料,SLE患者血浆IL-35水平与抗核抗体滴度之间的相关性分析用Spearman秩相关分析,与其他各临床指标之间的相关性分析采用非参数的Spearman相关分析,Plt;0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1酶联免疫吸附试验检测SL
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