实验-血糖测定(葡萄糖氧化酶法).doc

实验 血糖测定（葡萄糖氧化酶法） 【目的】 体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。 【临床意义】 葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。通常在查找这些病症的起因时，还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。葡萄糖含量增高见于：糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。葡萄糖含量减少见于：胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。 【原理】 样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。 【器材】 紫外分光光度计，恒温水浴箱，移液器（枪），枪头，试管 【药品】 葡萄糖测定试剂盒，试剂盒主要成分与浓度： 试剂 主要成分 实验浓度 R1 葡萄糖氧化酶（GOD） 过氧化物酶（POD） ≥13000U/L ≥900U/L R2 磷酸缓冲液（pH7.0） 酚 4-氨基安替吡啉 100mmol/L 11mmol/L 0.77mmol/L 葡萄糖标准液 5.55mmol/L(100mg/dl) 【样本】 新鲜无溶血血清。 【步骤】 将10ml R1与90ml R2混合均匀，即为工作液。 空白管 校准管 样品管 工作液 1.50 ml 1.50 ml 1.50 ml 蒸馏水 0.01 ml —— —— 校准液 —— 0.01 ml —— 样品 —— —— 0.01 ml 分别混合均匀，37℃水浴10～15分钟（避免太阳光直射），用波长505nm、比色杯光径1.0cm，用空白管调“零”点测定各管的吸光度（A 【计算】 【参考值】 血清/血浆：3.89—6.11 mmol/L (70—110 mg/dl)。 此范围仅供参考，各实验室须建立本室的参考值范围。 【参考文献】 1．全国临床检验操作规程（第二版），主编：叶应妩，王敏三，1997，P616. 2．Trinder P. Ann Clin Biochem，1969，6: 24-27. 血糖测定实验所需器材： 紫外分光光度计（比色杯光径1.0cm）， 恒温水浴箱（能调温度的，37℃ 移液器（枪）（规格1.0ml 6个，20μl 6个），枪头各100个 试管50支，6个试管架 烧杯100ml一个，50ml（或25ml）6个 记号笔6支 蒸馏水1瓶