叶绿素及蓝绿藻二合一在线监测仪验收方案..doc
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产品名称:叶绿素在线监测仪
型号:TETHYS400
量程:0-400ug/L
检验项目:
(1)重复性
(2)准确度
(3)直线性
(4)最低检出限
标准样品:叶绿素a标准样品,蓝绿藻标准样品(推荐使用荧光藻蓝蛋白标准提取样品);
零点校正液:测试叶绿素a时推荐使用50%乙醇溶液作为零点校正液(也可使用重蒸馏水),测试蓝绿藻时使用重蒸馏水作为零点校正液。
量程校正液:使用80%F.S标准溶液。
试验条件:
环境温度:在(5~35)℃之间,试验期间的温度变化在±5℃以内。
相对湿度:相对湿度在85%下。
大气压:在(95~106)kPa压力下,其变化幅度在5%以内。
电源电压:(220±22)VAC。
电源频率:(50±0.5)Hz。
现场测试时,确保无外界强光直射仪器。
一、仪器现场调试方案:
1、实验准备
实验器具:1L棕色容量瓶,量筒,漏斗,1L试剂瓶,天平,洗瓶、药匙
试剂:叶绿素a标准样品、荧光藻蓝蛋白标准样品
溶剂:95%乙醇溶液、去离子水(或者重蒸馏水),5%硫酸溶液
50%乙醇溶液准备: 在1L试剂瓶中加入95%乙醇溶液500ml,在加入500ml去离子水,稀释至刻度、摇匀。
2、标准样品的准备
叶绿素a标准试剂推荐使用由“和光纯业株式会社”出品的,标准试剂在运输过程中做好低温贮藏和避光措施。
蓝绿藻采用的是激发波长为590nm,发射波长为650nm左右的单一波长的荧光分光光度计的原理。
由于现行国家对水中蓝绿藻的测量没有任何标准,所以截止到本公司制定此企业标准为止,暂无用于测量水中蓝绿藻的标准物质。通过本公司实验测试后,使用藻蓝蛋白的荧光特性符合试验要求。
藻蓝蛋白(C-PC)晶体是从螺旋藻中分离纯化的,为具强烈荧光的蓝色冻干粉末C = K * F
式中: C — 荧光物质浓度;
K — 物质荧光系数;
F — 荧光强度。
K一般为常数,可见,荧光强度和荧光物质浓度呈正比,所以仪器测定的蓝绿藻浓度及与荧光强度成正比,因此校正仪器本身实际是校正仪器测定荧光物质荧光强度的过程。
3、标准溶液的配置
3.1 叶绿素a标准溶液的配置
将冰冻存放的10mg叶绿素A标准物晶体用无水乙醇溶解并定量移至500mL棕色容量瓶中,用95%的乙醇溶液稀释刻度、捣匀。存放于-20℃的冰箱中。此储备液叶绿素a的浓度为20mg/L。(叶绿素a由“和光纯业株式会社”出品)。
调试液的配制:(在对叶绿素a溶液进行稀释配置时乙醇溶液可根据实际情况适当增高)
①空白溶液(用于仪表调零)50﹪乙醇溶液或者用二次蒸馏水;
②80ug/L的叶绿素a溶液:取上述浓度为20mg/L的溶液4.0mL,于1000mL棕色容量瓶中,用50﹪乙醇溶液稀至刻度、摇匀。
③200ug/L的叶绿素a溶液:取上述浓度为20mg/L的溶液10.0mL,于1000mL棕色容量瓶中,用50﹪乙醇稀释至刻度、摇匀。
④320ug/L的叶绿素a溶液:取上述浓度为20mg/L的溶液16.0mL于1000mL棕色容量瓶中,用50﹪乙醇稀释至刻度、摇匀。
⑤400ug/L的叶绿素a溶液:取上述浓度为20mg/L的溶液20.0mL于1000mL棕色容量瓶中,用50﹪乙醇稀释至刻度、摇匀。
⑥50ug/L的叶绿素a溶液:取上述浓度为20mg/L 的溶液0.25mL于1000mL棕色容量瓶中,用50﹪乙醇稀释至刻度、摇匀。
在深色的容量瓶中贮存高浓度的标准溶液。溶液应避光、低温、密封保存。稀释的标准溶液应现用现配。浓溶液储存在-20℃的密闭环境下有效期时间为半年。
3.2 蓝绿藻标准溶液的配置
将干燥存放的50mg荧光藻蓝蛋白标准物晶体用蒸馏水溶解并定量移至1000mL棕色容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度、摇匀。此时储备液的浓度为50mg/L。(荧光藻蓝蛋白由“美国sigma aldrich公司”出品)
调试液的配制:
①空白溶液(用于仪表调零):蒸馏水
②5mg/L的藻蓝蛋白溶液:取上述浓度为50mg/L的溶液100mL于1000mL棕色试剂瓶中,加900mL蒸馏水稀释至刻度、摇匀。
③10mg/L的藻蓝蛋白溶液:取上述浓度为50mg/L的溶液200mL于1000mL棕色试剂瓶中,加800mL蒸馏水稀释至刻度、摇匀。
④15mg/L的藻蓝蛋白溶液:取上述浓度为50mg/L的溶液300mL于1000mL棕色试剂瓶中,加700mL蒸馏水稀释至刻度、摇匀。
⑤20mg/L的藻蓝蛋白溶液:取上述浓度为50mg/L的溶液400mL于1000mL棕色试剂瓶中,加600mL蒸馏水稀释至刻度、摇匀。
荧光藻蓝蛋白储备液和调试液应现用现配,配制在
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