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血液凝固分析仪实验心得
随着血栓/止血检测在临床上的广泛应用,其为临床疾病的诊断、
治疗、预防与监测提供了许多富有参考价值的依据,得到了临床医生
的认可和欢迎,使血栓/止血的检测无论是在科研上还是在临床常规
应用上都得到了日新月异的发展。凝血仪的广泛使用紧随着血栓/止
血检测的发展步伐,从十几年前的仅有凝固法检测的半自动凝血仪,
到如今的具有凝固法、发色底物法、免疫法的全自动各系列凝血仪,
使血栓/止血的检测达到了快速、简便、准确的境界,有关凝血、纤
溶、抗凝系统的相关检测也可通过一台仪器检测出来。
我实验购进一台SysmexCA-1500全自动凝血分析仪,在使用的
过程当中积累了一定的经验,有如下一些体会,希望与广大的凝血仪
用户特别是SysmexCA系列凝血仪用户共同探讨。
1、SysmexCA-1500有先进的方法学:集凝固法、发色底物法、
免疫法三种方法于一体。
(1)凝固法:应用散射光比浊原理,检测血液凝固反应过程中
散射光强度的变化,从而检测与血液凝固相关的凝血因子的含量。凝
固法很早就应用于血凝的检测,但SysmexCA-1500使凝固法得到了
发展,即检测不同标本的基础散射光强度定为bH0%,然后分别测定50%
和100%,从而绘出曲线,这样就使溶血标本和乳糜血标本的凝血项
目检测成为可能,我们在临床标本的检测中也印证了SysmexCA-1500
的较强抗干扰能力。
(2)发色底物法:大部分抗凝系统的检测应用了发色底物法,
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我室应用发色底物检测通道批量检测过AT-III、PLG、PC、PS诸项指
标,结果显示发色底物通道具有良好的线性和重复性,而且检测时间
较快,标准曲线设置较简单,操作简便,适用于临床常规检测。
(3)免疫法:SysmexCA-1500创造性地将免疫比浊法引入到凝
血仪中,使许多有关血栓/止血的分子标志物的检测成为可能,特别
是在D-Dimer的常规检测方面提供了既快速又准确的定量检测方法,
可以称为凝血仪的一次革命。
D-Dimer是纤溶酶水解交联纤维蛋白的产物,是具有共价键的D
片段,是血栓形成的分子标志物,在DIC、DVT、PE等许多疾病的诊
断和治疗当中有重要意义,也得到了临床医生的认可。D-Dimer的实
验检测方法有定性和定量两类,定量检测又有ELISA(酶联免疫吸附
实验)、免疫比浊法和半定量的读卡法。因临床诊断和治疗的需要,
定量法为首选,且需要快速简便的方法,ELISA法虽准确,但不能及
时检测,不适用于临床即刻检测的需要。SysmexCA-1500采用的免
疫比浊法测定D-Dimer具备了免疫法的定量和快速检测的特点,为
D-Dimer的检测开辟了新天地。
CA-1500(含其他有免疫方法的CA系列凝血仪)采用的免疫比浊
测定法,以碘钨灯做光源,在405nm、575nm、800nm处产生滤过光,
其通过含有标本与胶乳试剂反应的试管时测得反应的浊度OD值,结
合反应的曲线,对照标准曲线可计算出标本中抗原的浓度。在具体的
检测当中,我们先后应用过biopool公司的Auto-Dimer和DADE
BEHRING公司的D-DimerPLUS检测试剂盒,检测的精度、准确度、
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灵敏度逐步提高,前者试剂检测的最大值为3200ug/l,