RNA干扰沉默HDAC1基因对胃凋亡组蛋白乙酰化和甲基化的影响_庄涵虚.pdf

网络出版时间：2014-02-15 17:52 网络出版地址：/kcms/doi/10.3969/j.issn.1673-4254.2014.02.21JSouthMedUniv,2.html ·246 · doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2014.02.21 J South Med Univ, 2014, 34(2): 246-250 基础研究 RNRNAA 干扰沉默干扰沉默HDACHDAC11 基因对胃癌细胞增殖基因对胃癌细胞增殖、、凋亡凋亡、、组蛋白乙酰组蛋白乙酰 化和甲基化的影化和甲基化的影响响 1 1 1 1 2 庄涵虚 ，马旭东 ，赖亚栋 ，许向农 ，王小众 1 2 福建医科大学附属漳州市医院消化内科，福建 漳州 363000 ；福建医科大学附属协和医院消化内科，福建福 州 350001 摘要：目的探讨RNA 干扰沉默HDAC1基因对人类胃癌MGC803 细胞增殖、凋亡及组蛋白乙酰化水平的影响。方法 设计针对 HDAC1基因小干扰RNA 片段，经脂质体转染入MGC803 细胞，RT-PCR 及Western blot 鉴定其干扰效果；MTT 法绘制细胞生长 曲线，TUNEL 分析细胞调亡，Western blot 检测组蛋白H3、H4 乙酰化、组蛋白H3K9 甲基化的影响及凋亡相关蛋白BCL-2、 pro-caspase-9、pro-caspase-3、C-myc 蛋白表达。结果 HDAC 1 siRNA转染MGC803 细胞后，HDAC1基因的mRNA、蛋白表达均 明显下降，有统计学意义（P0.05）；60、120、240 nmol/L HDAC 1 siRNA 处理24 h 后，细胞凋亡率分别为（18.5±3.5）%、（41.4± 4.3）%、（59.2±5.5）% ，而对照组仅为（4.8±2.7）% ，有统计学意义（P0.05）；同时下调Bcl-2、proCaspase-9、proCaspase-3、c-Myc 的 表达；上调细胞周期蛋白P21 的表达；干扰HDAC1 基因可上调组蛋白H3 ，H4 乙酰化水平，下调H3K9 甲基化水平。结论 干扰 HDAC1基因表达后可能通过上调与基因转录激活有关的组蛋白H3、H4 乙酰化水平，下调与基因转录抑制有关H3K9 甲基化水 平，从而抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡。 关键词：胃癌；组蛋白乙酰化；HDAC 1；RNA 干扰 Effect of siRNA targeting HDAC1 gene on proliferation, apoptosis, histone acetylation, and histone metylation in gastric cancer cells in vitro 1 1 1 1 2 ZHUANG Hanxu , MA Xudong , LAI Yadong , XU Xiangnong , WANG Xiaozhong 1Department of Gastroenterology, Zhangzhou Hospital Affiliated to Fujian Medical University, Zhangzhou 363000, China; 2Department of Gastroenterology, Union Hospital of Fujian Medical University, Fuzhou 350001, C