M期促进因子_MPF_在小鼠精子发生不同阶段的表达_孙燕.pdf

Online system: 农 业 生 物 技 术 学 报 Journal of Agricultural Biotechnology 2013, 21(11): 1358~1364 DOI: 10.3969/j .issn.1674-7968.2013.11.013 研究报告 Letter M 期促进因子(MPF)在小鼠精子发生不同阶段的表达 1,2 2 2 3 1 1 * 孙 燕 白汝岚 杨炜蓉 周琼 熊仲良 米自由 1 重庆市动物疫病预防控制中心，重庆40 1120 ；2 西南大学牧草与草食家畜重点实验室，重庆4007 16；3 重庆璧山县动物卫生监督所，重庆 402760 *通讯作者，Mizy@163.com 摘 要 M 期促进因子(M-phase promoting factor, MPF)是调节细胞周期进程的一个重要的蛋白酶，探讨 其在小鼠精子发生不同阶段的表达将有助于深入了解精子发生的分子机制。本实验通过测定不同年龄 的小鼠(Mus musculus) 睾丸生精细胞MPF 活性，采用流式细胞术分析生精细胞DNA 倍性，同时结合免疫 组化法分析MPF 两亚基(CDK1 和Cyclin B1)的表达，分析精子发生的时相特征及MPF 活性与精子生成之 间的相互关系。结果显示，小鼠睾丸四倍体细胞在18 日龄时突然由之前的相对平衡状态迅速升高达峰 值，随后则随年龄增加逐步降低。生精细胞单倍体则从18 日龄开始出现，20 日龄时迅速增多，随后随年 龄增加比例也进一步增大。表明细胞DNA 从18 日龄开始进行大量复制，进入减数分 的初级精母细胞 阶段。MPF 活性变化趋势与四倍体细胞的变化趋势相似，18 日龄MPF 活性达最高水平，随后降低，但在 56 日龄又开始升高。从免疫组化的结果来看，MPF 两亚基随日龄增长而表达增多，到18 日龄和20 日龄 其表达量最高，随后降低表达量。上述结果表明：小鼠睾丸在18 日龄开始出现四倍体细胞，表明精子发 生启动，生精细胞即将进入减数分 的初级精母细胞阶段，同时MPF 活性以及CDK1 和Cyclin B1 两亚基 在睾丸组织中的表达量都于18 日龄达到最高，表明MPF 可能在调控小鼠睾丸生精细胞减数分 的过程 中发 重要作用。 关键词 M 期促进因子(MPF)，精子发生，减数分 Expression of M- phase Promoting Factor(MPF) in Different Develop- ment Stages of Spermatogenesis in Mouse(Mus musculus) SUN Yan1,2 BAI Ru-Lan2 YANG Wei-Rong2 ZHOU Qiong3 XIONG Zhong-Liang1 MI Zi-You1 * 1 Chongqing Animal Disease Prevention and Control Center, Chongqing 40 1120, China; 2 Chongqing Key Laboratory of Forage Herbivorce, Southwest University, Chongqing 4007 16, China; 3 Bishan County Animal Health Authority，Chongqing 402760, China * Corresponding author, Mizy@163.com Abstract M-phase promoting factor (MPF) is an important protease in regulating cell cycle progression, explore the expression of MPF in different stages of spermatogenesis in mice will provide insight into the molecular mechanisms of spermatogenesis. The obj ect of thi