变态反应原性试验_培训课件.ppt

* * 免疫抑制、免疫刺激可在常规毒理学实验中进行观察和检测，过敏反应的某些改变也可在常规毒理试验中观察（如贫血、白细胞减少、血小板减少、肺炎、静脉炎、肾小球肾炎等与2、3、4型过敏反应相关，过敏性休克及致死与1型变态反应相关，欧共体建议采用小鼠局部淋巴结实验来代替常规的豚鼠皮肤过敏试验方法，以判断皮肤过敏性），目前自身免疫方面尚无标准公认而有价值的动物试验方法，但FDA推荐采用国窝淋巴结试验，抗原性方面目前也无标准试验方法（中和抗体的检测有价值和意义），其对人的预测性难以判断，目前我国正制订抗原性试验的技术指导原则（两个试验）。 * * 免疫毒理非临床安全性评价现状（2） 4）为检测免疫抑制毒性常规毒理试验（尤指长毒试验）需加强观察和检测的内容：（1）易出现该毒性的常见药物类别：拟用于影响免疫系统的化合物，类固醇类激素，神经系统药物，抗增殖药，抗病毒药 （2）重点检查的相关指标：临床生化、血液学（包括分类）、免疫系统相关器官重量的检查、免疫相关组织（脾、胸腺、淋巴结、骨髓，尤其是与给药途径相关性强的组织）病理学检查 * * （3）与免疫抑制相关的指标变化（注意其量效关系、改变率和不同种属间毒理变化的一致率）：骨髓抑制的表现如各类血细胞减少、贫血、白细胞减少、淋巴细胞减少、血小板减少、恶异质，血液细胞成分减少，病理学改变（发生率和严重程度）包括胸腺萎缩和/或免疫组织如脾脏、淋巴结和骨髓的细胞减少或坏死，脾脏或胸腺的重量减轻，感染发生率增加，肿瘤发生率提高，血清免疫球蛋白水平改变。 （4）如果上述结果明显提示免疫毒性的存在（尤其是病理和血液改变）应进行深入的试验以进一步评价免疫毒性的具体细胞靶点和机理。 * * 变态反应原性试验基础及实践 * * 报告内容 一、 变态反应原试验的基本概念 二、 具有变态反应原的物质 三、 抗体种类及过敏型 四、 变态反应原试验的设计思路 五、 变态反应原试验的实际 * * 一、变态反应原试验的基本概念 1、机体的防御功能 机体具有防御功能的免疫系统。该系统对微生物、化学物质等外来异物通过特异性抗体或致敏淋巴细胞进行各种防御作用，但有时这些防御过程对机体产生不良的反应。 2、变态反应原性试验的目的 变态反应原性试验就是研究药物对人体是否产生过敏性休克等变态反应原的可能性。研究药物变态反应原时，应介绍致敏原性和攻击原性两个概念，致敏原性是指药物或其分解物刺激机体的免疫功能而产生抗体的能力。攻击原性是指在致敏成立的动物再次注射抗原时，产生变态反应原性反应的能力。 * * 二、具有变态反应原性的物质 高分子物质: 蛋白质等多数具有变态反应原性。把这些物质给予动物后，可以产生抗体。这种状态称之为致敏状态。一般情况下，蛋白质、多聚糖、核酸等高分子化合物具有变态反应原性，当机体识别这些高分子等异物时产生抗体。 低分子物质：化学物质等低分子化合物一般不具有变态反应原性，但当这些物质与机体内高分子物质(血清白蛋白等蛋白质)结合时，可诱导低分子化合物产生自身的抗体 。具有这种性质的低分子化合物称之为半抗原，青霉素就是一个典型的例子，在临床上可以产生严重的过敏性休克。 * * 三、抗体类型及过敏反应型 抗体的类型：IgE 、IgM、IgG。 IgE抗体：产生过敏性休克称为Ⅰ型过敏反应 IgG及IgM抗体：可产生溶血性贫血称为Ⅱ型过 敏反应及血清病称为Ⅲ型过敏反应。 变态反应原试验最基本的要求：当药物给予机 体后是否产生抗体进行研究。 * * 四、变态反应原性试验的设计思路（1） 1、高分子化合物 一般情况下，高分子化合物既有致敏原性，又有攻击原性。所以在考察受试物是否具有变态反应原时，按照表1进行试验就可以得到正确的评价。 表1 传统的变态反应原性试验设计 组别 致敏 攻击 受试物组 受试物 受试物 阴性对照组 溶媒 受试物 阳性对照组 阳性对照物 阳性对照物 * * 四、变态反应原性试验的设计思路（2） 2、低分子化合物 化学物质等低分子化合物一般不具有变态反应原性，但当这些物质与机体内高分子物质(血清白蛋白等蛋白质)结合时，可诱导低分子化合物产生自身的抗体 。 表2 低分子化合物变态反应原性的设计