叶绿素含量的测定具体方法.doc

一、叶绿素的测定：乙醇提取比色法，参考陈建勋、王晓峰等方法，有改动。 将实验材料去除大主脉，在0.0001的天平上称取0.5g左右的叶片至于50ml离心管中，依次加入25ml95%的乙醇密封，在黑暗条件下室温提取24-36h，将提取液稀释一定的倍数（根据具体情况而定），随后在UV754N紫外可见分光光度计，波长665、649、470nm下分别进行比色。根据各波长的 OD 值按照李合生的方法计算叶绿素 a、b 和类胡萝卜素的浓度（mg·L-1），根据求得的浓度计算出各色素含量（mg·g-1鲜重表示）。 Ca=13.95D665－6.88D649 Cb=24.96D649－7.32D665 Cx.c=(1000D470－2.05Ca－114.8Cb)/245 色素在叶片中的含量(mg /g)=色素浓度(mg /L)×提取液总体积(m l)×稀释倍数/样品质量(g)。