EV71病毒抗原蛋白VP1基因重组载体疫苗研究的开题报告.docx
EV71病毒抗原蛋白VP1基因重组载体疫苗研究的开题报告
一、课题背景
EV71病毒是一种可引起手足口病等疾病的RNA病毒,其流行区域主要集中在亚洲地区。近年来,随着全球旅游和人员流动的增加,EV71病毒引起的疾病在国际间也受到了越来越广泛的关注。然而,由于其病毒结构复杂,制备传统的病毒灭活疫苗存在很大的困难。因而,开展重组VP1基因载体疫苗研究,研制EV71疫苗,具有非常重要的意义。
二、研究目的
本研究旨在利用重组技术构建EV71VP1基因载体疫苗,并对其进行表达、纯化,以及对其抗原性、免疫原性及安全性进行评价。
三、研究内容
1.检测EV71VP1基因的表达和纯化
2.鉴定重组VP1基因疫苗抗原性和免疫原性
3.对重组VP1基因疫苗进行小鼠和猴子的动物实验
4.对重组VP1基因疫苗安全性进行评价
四、研究方法
1.采用PCR技术扩增EV71VP1基因,并进行重组表达载体构建
2.采用大肠杆菌表达系统进行VP1基因蛋白表达与纯化获得重组VP1基因蛋白以及对其进行纯化
3.通过Westernblot和ELISA等方法检测重组VP1基因蛋白的表达及其免疫原性和抗原性
4.采用BALB/c小鼠和初级猴接种重组VP1基因疫苗,观察动物免疫反应并评估疫苗效力及二次感染保护力
5.对动物实验中的剂量和免疫程序进行优化,同时对重组VP1基因疫苗的安全性进行评价。
五、预期结果
本研究的预期结果为,利用重组技术成功构建出EV71VP1基因载体疫苗,并对其进行成功表达、纯化;测定其抗原性和免疫原性,评估其在动物体内的免疫效力和二次感染保护力;评价其在体内和体外的安全性等。预期结果将为EV71重组VP1基因疫苗的研发提供技术支持和实验依据,同时也为疾病防治提供了新的思路和方法。