实验理化因素对细菌影响.ppt

IMViC试验 吲哚（I）、甲基红（M）、VP（Vi）、枸橼酸盐利用（C）合称IMViC试验。 大肠杆菌结果（＋＋－－） 产气杆菌结果（－－＋＋） ⑾硝酸盐还原试验 细菌还原硝酸盐成为亚硝酸盐的能力是区别细菌属和种的重要特性。使硝酸盐还原的细菌从硝酸盐中获得氧而形成亚硝酸盐等，加入a-萘胺和对氨基苯甲酸，成红色。 硝酸盐 亚硝酸盐 a-萘胺和对氨基苯甲酸各1ml， 实际1~2滴甲乙混合液 红色（阳性） 30s 大肠杆菌+ 绿脓杆菌- ⑿氧化酶试验 大肠杆菌- 绿脓杆菌+ 细胞色素氧化酶（氧化酶）可使细胞色素C氧化，再由氧化型细胞色素C使对苯二胺氧化，生成有色化合物（深紫色），为阳性。 操作：取菌到滤纸上，滴加氧化酶试剂，10s 内观察结果。 ⒀KIA复合试验 KIA琼脂中含有乳糖浓度是葡萄糖的10倍，分解糖可产酸，使酚红指示剂变黄色；硫代硫酸钠可供给细菌产生硫化氢所需要的硫，铁盐可与硫化氢反应，生成黑色沉淀。 方法：可疑菌穿刺和斜面划线接种，35℃培养18～24h观察结果。 KIA复合试验 结果：碱性（K）红色，酸性（A）黄色 　K/K：不发酵碳水化合物，为不发酵菌特征，如绿脓杆菌。 　K/A：不发酵乳糖（斜面），发酵葡萄糖（底层 ），如志贺菌。 　K/A（黑色）：不发酵乳糖，发酵葡萄糖并产生硫化氢，如沙门菌。 　　A/A：发酵乳糖和葡萄糖，如大肠埃希菌。 斜面 底层 产气 H2S 细菌名 A A + - 记录为：菌名KIA(AA+-) 应用：主要用于革兰阴性杆菌，尤其是肠杆菌科细菌的鉴定。 ⒁MIU复合试验(动力、靛基质、尿素酶试验) 原理：将半固体观察动力、靛基质试验和尿素酶试验综合到一起。 方法：将可疑菌穿刺接种到MIU培养基内，35℃培养18～24h观察结果。 结果：动力阳性：可见接种线变宽、变模糊、培养基变浑浊； 靛基质阳性：加入靛基质试剂的界面形成玫瑰红色； 尿素酶试验阳性：培养基全部变成桃红色。 动力 吲哚 尿酶 细菌名 + + - 记录为：菌名MIU(++-) 应用：常用于肠杆菌科细菌的鉴定。 利用分解代谢的产物和能量，合成新的物质。 ◆ 致病：热原质、毒素和侵袭性酶 ◆ 治疗：抗生素、维生素 ◆ 鉴别：细菌素、色素 ★ 合成代谢产物 图 脂溶性色素 脂溶性色素 图 水溶性色素 带荧光的绿色水溶性色素 明天？看结果，交实验报告 1、实验内容 2、紫外线杀菌的原理、图示结果 3、结果记录 化学消毒剂对细菌的作用结果 项目 菌种 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 抑菌圈直径（mm） 75%酒精 95%酒精 2. 5%碘酒 生理盐水 热力对细菌的影响结果观察（混浊还是澄清？） 处理方式 不处理（对照） 煮沸 灭菌20min 高压 蒸气灭菌 20min 结果 大肠杆菌：? 枯草杆菌：? 大肠杆菌：? 枯草杆菌：? 大肠杆菌：? 枯草杆菌：? 结果 测量抑菌圈直径 药物 青霉素 （100U/ml） 链霉素 （1000μg/ml） 庆大霉素 （1000μg/ml） 生理盐水 抑菌环直径（mm） 敏感度 抑菌环直径（mm） 敏感度 抑菌环直径（mm） 敏感度 抑菌环直径（mm） 敏感度 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 绿脓杆菌 菌种 细菌对药物的敏感程度 抗生素种类与浓度 抑菌环直径（mm） 试验菌的敏感程度 青霉素G （100U） ≤28 28 ～29 ≥29 耐药(R) 中介(I) 敏感(S) 庆大霉素 （10μg/片） ≤12 13～14 ≥15 R I S 链霉素 （1000μg/ml） 　≤10 10～14 ≥15 R I S 克林霉素 （2μg/片） 　≤14 15～20 ≥21 R I S 先锋V （30μg/片） 　≤14 15～17 ≥18 R I S 实验报告 实验项目、各项实验的原理（简化） 结果记录 实验项目\细菌名 大肠杆菌 产气杆菌 伤寒杆菌 乙副 变形杆菌 绿脓杆菌 1.糖发酵试验（乳/葡） 2.甲基红试验 3.VP试验 4.吲哚试验 5.尿素酶试验 6.明胶液化试验 7.H2S试验 8.苯丙氨酸脱氨酶试验 9.氨基酸脱羧酶试验 10.枸橼酸盐利用试验 11.硝酸盐还原试验 12.氧化酶试验 13.KIA复合试验 14.MIU复合试验 1、糖发酵试验（乳糖、葡萄糖）（大肠、伤寒） 2、甲基红试验（大肠、产气） 3、