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兽医免疫学——第十章 凝集性试验 页码，1/13 第十章 凝集性试验 学习要点： 凝集试验的概念、原理、分类，以及常用的凝集试验类型。 沉淀试验的概念、原理、分类，以及常用的沉淀试验类 于所用抗原的性状不同，出现的现象也不同： 1、细菌、红细胞或表面带有抗原的乳胶颗粒等不溶性颗粒抗原,当与相应抗体结合，抗原与抗体结合形成凝集团块，即 (agglutination)。 2、病毒、蛋白质等可溶性抗原与抗体结合，在两者比例合适时,可形成较大的不溶性免疫复合物，在反应体系中出现不透明的 淀反应(precipitation reaction)。 一节 凝集试验（agglutination test） 细菌、红细胞或表面带有抗原的乳胶颗粒等不溶性的颗粒抗原,当与相应抗体结合，在有电解质存在时,抗原与抗体结合形成凝集 凝集试验。凝集试验中的抗原称为凝集原 （agglutinogen），抗体称为凝集素 （agglutinin） 一、凝集试验的一般原理 通常，细菌和红细胞等颗粒性抗原在悬液中带弱负电荷,周围吸引一层与 牢固结合的正离子，外面又排列一层松散的负 子层，使颗粒相互排斥。 当特异抗体与相应抗原颗粒互补结合时，抗体的交联作用克服了抗原颗粒表面的电位，而使颗粒聚集在一起。 二、凝集试验的发生分两阶段 1、抗原抗体的特异结合； 2、在电解质的参与下，出现可见的凝集颗粒。 三、凝集试验的用途 /course2/symyx/skja/Ch10.html 2011-1-17 兽医免疫学——第十章 凝集性试验 页码，2/13 凝集试验方法简便，敏感度高，因而在临床检验中被广泛应用。 1、可用于定性的检测， 即根据凝集现象的出现与否判定结果阳性或阴性。 2、 也可进行定量检测， 即将标本作一系列倍比稀释后进行反应，以出现阳性反应的最高稀释度作为滴度。 四、凝集试验的分类 1、直接凝集试验 （direct agglutination） 细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原，在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。 直接凝集试验分为：玻板凝集试验和试管凝集试验。 （1）玻板凝集试验：为定性试验方法 ① 用已知抗体作为诊断血清、与待检颗粒抗原悬液各加一滴在玻板 ，混匀； ② 数分钟后即可用肉眼观察凝集结果：出现颗粒凝集的为阳性反应 此法简便、快速，适用于：细菌分离株的鉴定与分型；红细胞ABO血型的鉴定。 （2）试管凝集试验：为定量试验方法 ① 常用已知抗原液与一系列稀释的受检血清混合； ② 保温后观察每管内抗原凝集程度；以产生50%凝集的最高稀释度作为血清中抗体的效价,亦称为凝集价、滴度。 /course2/symyx/skja/Ch10.html 2011-1-17 兽医免疫学——第十章 凝集性试验 页码，3/13 （3）在试验中， 于电解质浓度和pH不适当等原因，可引起抗原的非特异性凝集，出现假阳性反应，因此必须设不加抗体的稀 自家凝集 酸凝集 2、间接凝集试验 （indirect agglutination） 将可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小的颗粒性载体的表面，然后与相应抗体(或抗原)作用，在适宜电解质存在的条 集现象。 （1）正向间接凝集试验：用抗原致敏载体以检测标本中的相应抗体。 （2）反向间接凝集试验：用特异性抗体致敏载体以检测标本中的相应抗原。 （3）间接凝集抑制反应：诊断试剂为抗原致敏的颗粒载体及相应的抗体，用于检测标本中是否存在与致敏抗原相同的抗原 也可用抗体致敏的载体及相应的抗原作为诊断试剂,以检测标本中的抗体，此称反向间接凝集抑制反 /course2/symyx/skja/Ch10.html 2011-1-17 兽医免疫学——第十章 凝集性试验