SN_T 3426-2012美洲山楂锈病菌检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3426—2012美洲山楂锈病菌检疫鉴定方法Detection and identification of Gymnos porangium globosum (Farlow)Farlow2013-07-01实施2012-12-12 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3426—2012前創言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、昆明理工大学、西南林学院。本标准主要起草人：章桂明、程颖慧、周德群、王颖、陈枝楠、赵瑞琳、仲建忠、李秋枫、向才玉、张雪。1 SN/T 3426—2012美洲山楂锈病菌检疫鉴定方法1范围本标准规定了美洲山楂锈病菌(Gymnosporangium globosum Farl.）的检疫鉴定方法。本标准适用于美洲山楂锈病菌寄主上的美洲山楂锈病菌的检疫鉴定。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件2. 1性孢子器（pycnia）和性孢子（pycniospore）性孢子器由担孢子萌发形成的单核菌丝体侵染寄主形成的，是锈菌的性器官。性孢子器中有性孢子和受精丝，性孢子单核。2. 2锈孢子器（aecia）和锈孢子（aeciospore）锈孢子器由性孢子与受精丝结合或与单核菌丝结合产生的双核次生菌丝组成，其中产生的串生、单胞、双核、黄色、球形或卵形的孢子即为锈孢子。2. 3夏孢子堆（uredinia)和夏孢子（rediniospore生多次，通常为黄色、橙黄色。夏孢子堆是双核菌丝产生的成维的双核孢子，在生长季节可连续夏孢子为单胞、双核，球形、卵形、椭圆形、下端平截的椭圆形、下端平截上端稍粗的棱形等，表面有细刺或疣刺。2. 4冬孢子堆（telia)和冬孢子（teliospore）由双核菌丝产生的厚壁有性孢子为冬孢子，一般是在生长后期形成的休眠孢子。单胞或多胞。2.5担子（basidia）和担孢子（basidiospore由寄主体上的冬孢子萌发产生的。担子横裂四胞，每胞生一小柄，其上生担孢子。担孢子单胞，无色或稍带黄色。3原理3.1 基本信息学名:Gymnosporangium globosum(Farlow)Farlow英文俗名：:American Hawthorn Rust分类地位：美洲山楂锈病菌属真菌界 Fungi、担子菌门Basidiomycota、锈菌纲Urediniomycetes、锈菌目Uredinales、柄绣菌科 Pucciniaceae、胶锈菌属 Gymnosporangium。近似种:亚洲胶锈菌 Gymnosporangium asiaticum、楹锈病菌 G.clavipes、苹果锈病菌 G.yamadae、G. juniperi-virginianae SN/T 3426--20123.21鉴定原理美洲山楂锈病菌的形态特征（参见附录A)是该菌鉴定的主要依据，同时参照病原菌在寄主植物上的危害症状、寄主范围（参见附录B、附录C），应用显微镜等相关仪器对美洲山楂锈病菌进行检疫鉴定。4仪器用具与试剂4.1仪器用具体视显微镜、生物显微镜、高压灭菌锅、冰冻切片机、滴管、镊子、放大镜、酒精灯、手术刀、手术剪、载玻片、盖玻片、标签。4.2试剂无水乙醇、75%乙醇、乳酚油、无菌水。5 检疫鉴定5.1 症状观察观察美洲山楂锈病菌的蔷薇科寄主植物的叶片上是否出现性子器和锈子器。性子器成簇筷生长，在叶片表面形成棕色斑点。锈子器成簇或呈环形，在叶片背部与性子器相对应的位置形成泛白或呈褐色的斑点。观察美洲山楂锈病菌的转主寄主刺柏属植物植株的茎部、小枝、枝条上有无斑点，有无栗棕色冬孢子堆形成。症状图参见图A.2。5.2形态观察取具有可疑症状的叶片、枝干、枝条样品，在体视显微镜下选取切片完整的组织，切片、制成玻片，在显微镜下观察病原菌形态特征。6鉴定特征美洲山楂锈病菌在寄主叶片上表面产生成簇的性子器，棕色斑点状，直径约为 1mm～3mm。在叶片下表面与性子器相对的位置处产生锈子器，成簇或呈环形，直径2mm～5mm，管状，顶端较尖且侧边开裂,泛白色或呈褐色，高 1 mm～4mm,宽0.2mm～0.5 mm，内含物呈锈棕色。锈孢子球状或宽椭圆形，-般较硬,15 μm～23 μm，壁浅黄褐色，有较浅的疣状突起，几近平滑，厚度为 1.5 μm～2μm,含有7～9个气孔。包被细胞长菱形,略有条纹。冬孢子堆圆锥形，生于小枝或枝条边缘,高 3mm～12 mm,宽1.3mm，栗棕色。冬孢子椭圆形至拟纺锤形，双胞，轻微皱缩，圆形或锥形.具有长柄，(35 μm～40 μm)×（7 μm～24 μm）,壁黄色至金黄色，厚度 0.5 μm～2.5 μm