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一种新的快速扩增EBV和CMV特异性T细胞技术用于过继细胞治疗的实验研究的开题报告

背景

过继细胞治疗（adoptivecelltherapy,ACT）是一种非常新的抗癌治疗方法，旨在提高患者自身的免疫系统对癌细胞的反应能力。该方法包括从患者的外周血或肿瘤组织中采集T细胞，然后扩增和增强这些细胞的能力，并重新注入到患者体内，以增加免疫系统对肿瘤的反应。Epstein-Barrvirus(EBV)和cytomegalovirus(CMV)是两种常见的人类病毒，它们可以潜伏在细胞内很长时间，这使得EBV和CMV感染导致产生了特异性T细胞反应。这些特异性T细胞可以在过继细胞治疗中被利用，以更准确地识别和打击肿瘤细胞。

问题

然而，目前的EBV和CMV特异性T细胞扩增技术需要简单的培养细胞或使用复杂且费时的方法，如多肽刺激等。此外，在用于实际治疗之前，必须考虑到特异性T细胞的冷链保存和大规模生产问题。因此，本研究将尝试开发一种新的快速扩增EBV和CMV特异性T细胞技术，以更好地满足临床应用的需求。

方法

本研究将利用基于慢病毒转染的基因表达系统（Lentivirus-basedgeneexpressionsystem），将EBV和CMV抗原基因转入到T细胞中。这种方法可以方便，快速和高效地转染T细胞，并在T细胞暴露于抗原时增强T细胞的反应性。此外，我们将使用CRISPR-Cas9技术，编辑T细胞的抗原受体，以增强特异性T细胞的反应。这种方法可以特异性地定向编辑T细胞的抗原受体基因，并使T细胞更加专一地识别和攻击肿瘤细胞。最后，我们将探究新方法下得到的EBV和CMV特异性T细胞的生存期和细胞活性。

预期结论

我们预计，利用基于慢病毒转染的基因表达系统和CRISPR-Cas9技术，可以开发出一种更快速，更有效且特异性更高的扩增EBV和CMV特异性T细胞的技术。此外，我们希望这种技术可以帮助解决现有技术所存在的冷链保存，大规模生产等问题。最后，我们期望这种新技术的生存期和细胞活性会得到更好的提高。