22 509-511 下转462 工艺技术 3+12 产酯化脂肪酶微生物筛选研究.pdf

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2010, Vol.26, No.5 产酯化脂肪酶微生物的筛选研究 梁晓夏，黄佳箭，戚启琼，李日伟，梁静娟 （广西大学生命科学与技术学院，广西南宁530005 ） 摘要：用罗丹明B透明圈法从广东、广西和海南采集的土样中筛选到658株透明圈比较明显的菌株，经发酵测定脂肪酶酶 活，获得15株脂肪酶活力超过7 U/mL 的菌株，采用固定化脂肪酶粗酶制剂的方法进行酯化能力的测定，得到产生酯化脂肪酶能力较强的3个菌株GX-20 、GX- 35 GX-53 ，它们的酯化率分别为18.12%、20.65% 19.72%。其中的GX-35菌株经16S rDNA基因序列分析鉴定为Burkholderia cepacia。 关键词：酯化脂肪酶；罗丹明B透明圈法；16S rRNA序列 文章篇号：1673-9078(2010)5-509-511 Screening of Lipase-producing Microorganisms LIANG Xiao-xia, HUANG Jia-jian, QI Qi-qiong, LI Ri-wei, LIANG Jing-juan (College of Life Science Technology of Guangxi University, Nanning, 530005, China) Abstract: Six hundred and fifty eight strains of microorganisms with lipase-producing capability were obtained using Rhodanmine B plate. The lipase activities of 15 strains were more than 7 U/mL. The capacity of the 15 strains in catalyzing transesterification was determined by alkali titration assay and the methods of immobilized crude enzyme. Three strains GX-20, GX-35 and GX-53 showed higher transesterification activity than the others. The transesterification rates by the three strains were 18.12%, 20.65% and 19.72%, respectively. GX-35 was identified as Burkholderia cepacia according to 16S rDNA gene sequence analysis. Key words: transesterification lipase; screening on Rhodanmine B plate; 16S rRNA sequence 509 近年来，由于能源危机已经成为一个世界 酶对长链脂肪醇的酯化或转酯化有效，而对短 性的难题，人们开始致力于开发新的可再生性 链脂肪醇如甲醇或乙醇等转化效率低，而且由 生物能源。我国液体燃料短缺，能源消费结构 于短链醇对酶的毒性直接导致了酶的使用寿 性矛盾长期存在，发展生物柴油产业，部分替 命短，不能在大工业生产中反复使用。此外， 代化石柴油，已成为当前可再生能源发展的必 副产物甘油和水难于回收，不但对产物形成抑 然趋势。生物柴油是指生物油脂( 目前用得较 制，而且由于甘油对固定化酶有毒性，使得固