CD4+CD25+调节性T细胞与原因不明复发性流产的相关性研究.ppt

CD4+CD25+调节性T细胞与原因不明复发性流产的相关性研究 上海交通大学医学院附属仁济医院 林其德教授 Treg细胞是近年发现的一类具有免疫抑制作用的T细胞亚群，具有免疫低反应性和免疫抑制性两大特征 Treg能抑制自身免疫疾病的发生，在肿瘤免疫和移植免疫中也发挥重要作用。 正常妊娠是一种成功的半同种移植现象，母体对胚胎抗原的免疫耐受，直接影响妊娠的建立和维持。 一旦这种免疫耐受被打破，就会发生流产或其它病理妊娠 Treg是否参与正常妊娠过程中免疫耐受的维持？ 在正常月经周期中的不同阶段，子宫内膜中Treg细胞的比例呈动态变化，在卵泡期末明显升高，提高了内膜容受性，使内膜更适于随后的胚胎种植 正常妊娠的不同阶段，蜕膜中Treg细胞比例亦呈动态变化，早孕期Treg比例即明显增加，滋养细胞最大程度侵入时达高峰，之后逐渐下降，产后明显下降并逐渐恢复至正常水平。 一 、不明原因复发性流产患者中Treg细胞数量变化的研究 小结 无论以CD4+CD25bright或CD4+CD25+ CD127dim/- 或FoxP3+作为Treg的筛选标记，均发现URSA组外周血和蜕膜Treg表达频率低于正常妊娠组，提示URSA发生可能与Treg表达频率的变化有关。 主动免疫治疗后（尤其是治疗成功者）外周血CD4+CD25bright Treg表达频率增高，进一步证实Treg与URSA发生有关。 二、不明原因复发性流产患者中 Treg细胞功能变化的研究 细胞分泌功能的影响的影响 两组外周血和蜕膜中Treg细胞均能抑制CD4+CD25-T细胞分泌Th1型细胞因子IFN-γ，从而有助于妊娠的维持. URSA组Treg对CD4+CD25-T细胞分泌IFN-γ的抑制较弱 对细胞凋亡的影响 正常妊娠组Treg细胞能促进CD4+ CD25-T细胞的凋亡。 URSA组Treg对CD4+CD25-T细胞的凋亡无明显促进作用 两组外周血和蜕膜中Treg细胞均能抑制CD8+T细胞分泌Th1型细胞因子IFN-γ. URSA组Treg细胞对CD8+T细胞分泌IFN-γ的抑制较弱 4、Treg对树突状细胞（DC）的影响 正常妊娠组外周血和蜕膜中Treg细胞能促进DC细胞 分泌Th2型细胞因子IL-10 ，有助于妊娠的维持. URSA组Treg细胞没有类似效应。 5、Treg对巨噬细胞的影响 两组外周血和蜕膜Treg细胞均能促进URSA蜕膜巨噬细 胞分泌IL-10，抑制其分泌IFN-γ，且抑制其表达CD80和CD86 URSA组中Tr细胞胞的上述效应强度显著低于正常妊娠组 小结 URSA组外周血和蜕膜中Tr细胞不仅数量减少，还存在功能缺陷。 URSA组Tr对各种免疫职能细胞（CD4+CD25-T细胞、 CD8+T细胞 、 NK细胞、DC、巨噬细胞）的免疫负调控减弱（抑制增殖、促进凋亡、影响细胞因子分泌等），进一步证实了Treg在URSA免疫发病机理中的作用 三、蜕膜局部免疫环境的改变 四、 TGF-β1 对Treg的影响 TGF-β1可诱导外周血和蜕膜Treg细胞生成， 表现为： 五、动物实验 流式细胞术检测结果显示：与对照组相比，流产模型(CBA/J×DBA/2)孕鼠外周血、胸腺和脾脏中CD4+ CD25+调节性T细胞表达频率均明显降低 2、正常孕鼠CD25抗体干预妊娠实验 抗CD25抗体处理后，正常孕鼠模型 外周血、胸腺和脾脏中Treg细胞（ CD4+CD25+ 或CD4+CD25+ FoxP3+ 标记）表达频率显著下降 3、过继性转移CD4+CD25+Tr 治疗实验 分离正常妊娠孕鼠脾脏的Treg细胞，过继性转移至流产孕鼠模型，可有效减少胚胎丢失。 4、过继性转移TGF-β诱导生成的Treg细胞  治疗实验 5、过继性转移转染FoxP3的CD4+CD25-T 细胞治疗实验  流产动物模型的研究结果说明：流产的发生与Treg数量变化有关；抗CD25抗体处理可使正常孕鼠模型外周血、胸腺、脾脏中的Treg数量减少，胚胎丢失率增加，进一步证明了这一结论。 向流产孕鼠模型过继转移正常孕鼠Treg或TGF-β1诱导生成的Treg或转染FoxP3的CD4+ CD25-T细胞，均可使流产孕鼠外周血、胸腺、脾脏中的Treg数量增加，胚胎丢失率降低。这进一步证实Treg和流产发生密切相关，TGF-β体外诱导或FoxP3转染CD4+CD25-T细胞均可生成的有功能的Treg。 * * * Treg参与正常妊娠过程中母体免疫系统 对胚胎组织的免疫耐受 1、以CD4+ CD25bright 作为Treg筛选标记 URSA组外周血和蜕膜CD4+ CD25bright Tr的数量均较正常妊娠组减少 正