生物分子相互作用研究重要工具.ppt

Scheme 2. Oxime chemical ligation reaction between the Aoa–GFAKKG peptide and an oligosaccharide. An equilibrium is established between the imino and amino (both a and b) forms. The oxime chemoselective ligation reaction between the highly reactive amino group of an aminoxyacetyl (Aoa) containing peptide and the reducing end of an oligosaccharide has been demonstrated to be a powerful approach to glycoconjugates. A) Selective interaction of WGA (7.81 nm) with the GlcNAc5–peptide surface. No interaction was observed with the reference cell which contained immobilized lactose. B) Competition experiment for WGA. Binding of WGA (250 nm) on low (100 RU) and high (1500 RU) density surfaces of immobilized carbohydrate probe. Binding of WGA to immobilized GlcNAc5 at seven different concentrations. Interaction of proteins and antibodies CM5 Research Grade Sensor chips carboxymethyldextran derivatized surface Activeted by EDC/NHS Immobilized of antibody Injection of sample (diluted plasma) J. Mol. Recognit. 2003; 16: 15–19 MALDI-TOF MS EMERGING APPLICATION AREAS Food and environment analysis Immunogenicity Proteomics Drug discovery hit, ADME Clinical analysis SPR的优点 待测物无需标记 适用于混浊、不透明或者有色溶液 能实时、连续监测反应动态过程 检测方便、快捷 应用范围广 SPR缺点 难以区分非特异性吸附 对温度、样品组成等干扰因素敏感 SPR传感技术的发展趋势 SPR 传感技术具有无可比拟的优势，它在很多领域都具有广阔的应用前景。然而现有的SPR 传感技术与传统分析手段相比，特别是与免疫检测手段相比，在检测成本、易用性、稳定性、检测效率以及灵敏度等方面还存在一些不足。这就决定了该技术今后几年的主要发展趋势 进一步提高检测灵敏度及分辨率 实现多通道检测 器件微型化和阵列化 降低检测成本 SPR发展方向 高通量 SPR 成像 微流控 SPR sensor SPR-MS SPR IMAGING Anal Bioanal Chem (2004) 379: 328–331 SPR IMAGING DNA Microarray on AU film 检测限 10nM 空间分辨:50-70微米 微流控SPR Imagine Anal. Chem. 2001,73: 5525-5531 微流控SPR Imagine Anal. Chem. 2001,73: 5525-5531 样品量:1微升 是传统SPR检测的1/500 SPR-MS Anal. Chem. (2000) 404 A-411 A 展 望 SPR生物传感器经过20年来的发展,已经成为生命科学和制药领域的一种重要的研究工具。 在生物化学、免疫学、微生物检测、药物筛选及研发、环境污染的控制、医学诊断、食品及药物检测、工业遥感等方面都有不俗的表现。 随着SPR技术成为科研中的一个不可缺少的部分,SPR生物传感器的应用将更加趋向多样化,特别是它在小分子检测和脂膜领域的新兴应用将使其在未来的药物发现和膜生物学中扮演一个越来越重要的角色 总之，由于表面等