氟伐他汀对溶血磷脂酰胆碱损伤内皮细胞的保护作用-药理学专业论文.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 摘要目的：观察氟伐他汀对溶血磷脂酰胆碱损伤人脐静脉内皮细胞的 摘要 目的：观察氟伐他汀对溶血磷脂酰胆碱损伤人脐静脉内皮细胞的 保护作用，探讨他汀类药物降脂作用以外的其他抗动脉粥样硬化机 制，为他汀类药物的临床应用提供新的依据。 方法：体外培养人脐静脉内皮细胞，待细胞生长到融合状态时加 入不同浓度(10～一10巧mol／L)的氟伐他汀孵育20分钟，然后加入溶血 磷脂酰胆碱(5mg／L)作用24小时，用半定量逆转录一聚合酶链式反应 (RT-PCR)检测eNOS mRNA、MMP．9 mRNA的表达，免疫细胞染色 法检测NF．KBp65、ICAM．1、VCAM．1蛋白的表达，流式细胞仪检 测细胞凋亡率，四唑盐比色实验(MTT)检测细胞活力，比色法检测各 组细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、乳酸脱氢酶(LDH) 的活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(No)含量的变化。 结果：1、溶血磷脂酰胆碱能明显诱导内皮细胞MMP．9 mRNA 和NF．KBp65、ICAM．1、VCAM-1蛋白的表达，抑制eNOS mRNA 的表达，降低SOD、GSH的活性、NO的含量和细胞活力，并能明 显增加LDH的活性、MDA的含量以及促进细胞凋亡；2、预先应用 不同浓度的氟伐他汀干预后，可剂量依赖性的抑制上述效应；3、用 一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)抑制一氧化氮合 酶降低NO的合成后，可部分取消氟伐他汀的保护作用。 结论：1、溶血磷脂酰胆碱可诱导血管内皮细胞产生氧化应激和 炎症反应，导致内皮细胞功能紊乱；2、氟伐他汀可通过促进NO的 释放以剂量依赖的方式抑制溶血磷脂酰胆碱诱导的氧化应激，减少内 释放以剂量依赖的方式抑制溶血磷脂酰胆碱诱导的氧化应激，减少内 皮细胞的氧自由基损伤；3、氟伐他汀可通过促进NO的释放，抑制 NF．KB的活性，降低ICAM-1、VCAM-1和MMP．9的表达，抑制炎 症反应和稳定动脉粥样斑块；4、氟伐他汀对内皮细胞的保护作用除 了与其促进NO的释放有关外，可能还有其他的物质或信号转导途径 的参与。 关键词：氟伐他汀，内皮细胞，动脉粥样硬化，溶血磷脂酰胆碱， 氧化，炎症 Ⅱ ABSTRACTObjective ABSTRACT Objective：To observe the protection effects of fluvastatin on human umbilical vein endothelial cells(HUVECs)damaged by lysophosphati． dylcholine(LPC)，investigate the non·lipid mechanisms of 3-hydroxy．3． methyl—glutaryl coenzyme A(HMG-CoA)reductase inhibitors on anti． atherosclerosis and provide a new evidence to statins in clinical applica- tion． Methods：The HUVECs were pretreated、Ⅳitll fluvastatin at different concentrations for 20 minutes before incubated with lysophosphatidyl． choline for 24 hours．The expression of endothelial nitric oxide synthase (eNOS)mRNA and matrix metalloproteinase一9(MMP．9)mRNA was detected by reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) the expression of NF—rJ3p65，ICAM一1 and VCAM．1 protein was detected by immunocytochemistry technique；the cell apoptosis rate was examined by flow cytometry，and the cell viability was measured by MTT．We observed the activity of the superoxide dismutase(SOD)，glutathion (GSH)and lactic acid dehydrogenase(LDH)，and the changes of the contents of malonalde