常用家禽的免疫学检测技术研究-免疫学论文-基础医学论文-医学论文.docx

常用家禽的免疫学检测技术研究-免疫学论文-基础医学论文-医学论文 ——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印—— 　　免疫学检测论文（8篇知网范文）之第六篇 　　摘要：疾病的检测和诊断是禽病防治的重要任务之一。免疫检测是指利用免疫学原理与技术，结合家禽特有的免疫特性，检测家禽抗原、抗体、补体、细胞因子、趋化因子等体液免疫指标以及免疫细胞活性，并通过对这些指标的分析，可以为疾病临床诊断、分析病情、调整饲养、管理、治疗和处理，以及对预后的判断提供重要的参考。在家禽饲养的过程中，如何利用家禽免疫学检测手段，监控不同养殖状态的家禽的体液免疫与细胞免疫功能，并使用科学分析和判断各项免疫学指标，得出对疾病进程的判断尤为重要[1-5]。本文旨在通过介绍目前常用的家禽免疫学检测技术及其要点，为临床禽病检测提供一些理论与技术参考。 　　关键词：常用家禽,免疫学检测  　　1 体液免疫相关检测技术 　　体液免疫检测技术是以抗原抗体结合为核心设计的一系列体外检测家禽体液免疫效应结果的试验技术。根据抗原的物理性状（可溶性或颗粒性）、抗体的类型和反应的条件（电解质、补体、琼脂等）不同，体液免疫效应可表现出凝集、沉淀、细胞溶解、发光、补体结合等反应。体液免疫检测技术的研究历史较长，检测的特异性、精确性和灵敏度高，试剂保存和试验操作方便，易于商品化和标准化，是目前发展最快、应用最广泛的免疫学检测技术之一。血清、血浆、分泌液、禽胚尿囊液、卵黄液、组织切片等均可用于进行体液免疫反应检测，并在常规家禽的免疫学检测中被广泛应用。下文将重点介绍目前禽病检测中常用的体液免疫相关的几种检测技术及其技术要点。 　　1.1 凝集反应 　　凝集反应是指细菌或病毒等颗粒性抗原与相应的抗体结合后，在电解质存在的情况下，形成肉眼可见的凝集物的现象。由于凝集反应方法简单，灵敏度高，特异性强，结果直观，在临 被广泛应用；既可用于抗原或相应抗体的定性检查，亦可将样品连续倍比稀释，对抗原或抗体进行半定量分析。凝集反应分为直接凝集反应和间接凝集反应两大类。如家禽疾病监测中常用到的直接凝集试验，也称为平板凝集试验（SPA），可以用于鸡白痢(SP)、副鸡嗜血杆菌感染（HPg）、小鹅瘟（GP）和鸡支原体感染(MG/MS)等疾病的诊断与鉴定；常用的间接凝集试验，也称为血凝试验（HA）与血凝抑制试验（HI），被广泛应用于新城疫(ND)、 (AI)、减蛋综合征(EDS)、鸡传染性支气管炎（IB）血清中抗体滴度监控和疾病监测，以及ND/AI等病毒性疾病感染的监控手段。检测时，应注意使用固定的抗原浓度，将抗体适当倍比稀释后进行试验，以避免由于抗体浓度过高导致形成的抗原抗体复合物过多而出现非特异性凝集现象。 　　1.2 沉淀反应 　　沉淀反应是指在电解质存在的情况下，可溶性抗原与抗体发生特异性的结合而产生肉眼可见沉淀物的现象。根据沉淀反应所用的材料与检测方法的不同，其主要分为液体内沉淀试验、凝胶内沉淀试验和凝胶免疫电泳试验三大类型。在家禽免疫诊断中使用较多的是凝胶内沉淀试验，该试验大多以半固态的琼脂凝胶作为介质，在沉淀反应发生的同时使可溶性抗原与抗体在其中扩散，并形成环状的沉淀线，所以又称琼脂免疫扩散试验。琼脂免疫扩散试验主要分为单向扩散与双向扩散两种。单向扩散是在琼脂凝胶配制的过程中加入少许抗体，使待测抗原溶液从局部向琼脂内扩散并形成可见的沉淀环。单向扩散可用于抗原定量测定方法，操作方法简便、易于观察，如操作规范可保证实验的可重复性与线性良好，但也存在一些弊端如时间较长需要1～2天才能看到结果，灵敏度较低（只能达到g/m L以上）、对血清的效价、亲和力和特异性要求较高等。双向扩散是让抗原与抗体各自向对方扩散，在比例恰当处形成沉淀线；可以通过观测这种沉淀线的形状、位置以及对比关系，对抗原抗体进行定性分析。双向扩散在禽病免疫检测中应用广泛，如鸡马立克病（MD）、鸡传染性法氏囊病（IBD）、 （AI）、禽霍乱、鸡白痢、鸡住白细胞虫病、禽支原体病、禽曲霉菌病、鸭病毒性肝炎等。免疫电泳是电泳分析与沉淀反应结合的产物，它使用电场加速了沉淀反应的产生，弥补了琼脂扩散实验时间长的缺点；同时，该技术还可利用电场规定抗原抗体的扩散方向，使得其更集中，增强了琼脂扩散检测的灵敏度。进行免疫电泳的关键有以下几点：(1)点样时需注意抗原成分常带负电荷，向正极运动，而抗体随水流方向朝负极运动或不运动；(2)需根据所用的免疫电泳反应选择合适的琼脂凝胶，如对流电泳应选择电渗作用大的琼脂，火箭电泳则应用电渗小或无电渗的琼脂。 　　1.3 病毒中和反应 　　抗体与具有生物学活性的抗原发生结合反应，从而失去其应有的生物活性的现象，被称为中和反应。根据中和类型分为病毒