高效液相色谱一荧光分析法测定人体尿液中的墨蝶呤.pdf

第35卷第1期 南昌大学学报(理科版) V01．35No．1 of Feb．201l Journal 2011年2月 NanchangUniversity(NaturalScience) 文章编号：1006一0464(2011)01一0060一04 高效液相色谱一荧光分析法测定人体尿液中的墨蝶呤 崔盼盼8，万益群8^‘ (南昌大学a．食品科学与技术国家重点实验室．b．分析测试中心，江西南昌330047) 摘要：建立了人体尿液中墨蝶呤的高效液相色谱一荧光分析方法。尿液经乙腈处理，过0．45um水相滤膜后定 容，叮进行液相色谱分析。色谱柱为DiamonsilC。。柱，以水一甲醇(80：20，v／v)为流动相，流速为1．0mL／min，荧光 nm。墨蝶呤含量在0．005—1．0 检测波长为A。=425nnl，A。=530 mCmL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关 系，线性回归方程为Y=106菇一328．02(r=0．9990)，检测限是0．002pe,／mL。其加标平均回收率在98．7％一 106．8％之间，相对标准偏差小于7．34％。该方法简便，应用于胃癌病人和健康人尿样中墨蝶呤测定，结果较好。 关键词：墨蝶呤；人体尿液；高效液相色谱；荧光检测 中图分类号：0657．7 文献标志码：A WATERS 蝶呤类化合物(Pteridines)属于蝶啶的衍生物， 515型高效液相色谱仪，配WATERS A 分布于整个生物界，种类较多，但含量甚微，其中主 2475型荧光检测器；OhausP210电子分析天平 要的几种蝶呤类化合物包括蝶呤(Ptefin)、新蝶呤 (Neopterin)、黄蝶呤(Xanthopterin)、异黄蝶呤(Isox-(江苏昆山市超声仪器有限公司)；TDL一5一A型低 速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；MS2型迷你 anthopterin)、蝶呤一6一羧酸(Pterin一6一carboxylic acid)、生物蝶呤(Biopterin)、墨蝶呤(Sepiapterin)和 Q 癌蝶呤(Oncopterin)等。研究表明，蝶呤类化合物在 生物体的细胞代谢过程中起着重要的辅助作用，当 墨蝶呤标准品(购自于美国AcrosOrganics)；甲 细胞免疫系统被癌症等疾病激活后，人体体液及其 醇、乙腈(色谱纯)；其它试剂均为分析纯，水为超纯 排出的尿液中蝶呤类化合物水平会明显改变，因此 水。 可作为癌症及多种类型疾病早期诊断的重要标志 1．2标准溶液的配制 物¨“J。其中，新蝶呤的研究较为深入，已应用于临 准确称取2．875mg墨蝶呤置于25mL棕色容 床上多种类型疾病的诊断和监测，如用于诊断鼻咽 量瓶中，加数滴1．0mol／LNaOH溶液溶解，用超纯 水稀释至刻度，摇匀，配成115．0 癌…、直肠癌旧J、肺癌L9o等癌症，其它蝶呤类化合物 I山g／mL墨蝶呤标 相对研究较少【10。15 准贮备液，置于一20℃冰箱内保存。使用时先于 J。墨蝶呤是蝶呤类化合物的一 种，目前主要研究对象为动物细胞¨6。171及人体脑脊4℃条件下解冻，稀释，配成所需要的浓度。