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猪流行性腹泻诊断方法研究进展 【摘要】猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED）是由猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）引起的乳猪的一种以呕吐、腹泻和脱水为主要特征的急性接触性肠道传染病。由于与该病类似的肠道性传染病较多，所以仅通过临床症状和病理组织学变化很难做出准确的诊断。只有借助实验室诊断技术进行鉴别诊断才能作出确诊。随着对PEDV基因组分子生物学研究的不断深入，多种分子生物学诊断技术开始出现，本文针对该病现有的分子生物学诊断方法进行了阐述。 【关键词】猪流行性腹泻；分子生物学；诊断；研究进展 Advances in diagnostic methods porcine epidemic diarrhea Abstrct Porcine epidemic diarrhea is a piglet from porcine epidemic diarrhea virus causes vomiting, diarrhea and dehydration as acute intestinal infectious contact the main feature. Because the disease is similar to intestinal infectious diseases, which is why only through clinical symptoms and pathological changes is difficult to make an accurate diagnosis. Only by means of laboratory diagnostic techniques in order to make the differential diagnosis confirmed. With the study of genomic molecular biology PEDV deepening variety of molecular biology diagnostic techniques began to appear, the paper for the disease existing diagnostic methods of molecular biology are described. Key words Porcine epidemic diarrhea; Molecular Biology; Diagnosis; Progress advance 前言 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea, PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrheavirus, PEDV)引起的一种严重的病毒性传染病。该病的特征是可以导致哺乳仔猪发生严重的腹泻、呕吐、脱水，并且致死率极高[1]。 猪流行性腹泻(PED)在1971年在英国首次被报道，之后1978 年在日本、德国、比利时等地爆发。 在1976年，中国首次报道了该病。 在这之后的20年间，该病已经在我国的20多个省份爆发，给农民及养猪业造成了巨大的损失。在欧洲，猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的腹泻主要集中在架子猪、育肥猪及青年种猪。在我国，各年龄的猪都极易感染PEDV的猪群[2]。在寒冷季节，猪的病毒性腹泻主要由猪流行性腹泻病毒引起，保育与育肥猪的群的感染率较高于哺乳仔猪和母猪[3]。 1.基因型 PEDV基因组是单股正链RNA，与其他的冠状病毒具有相似性。PEDV基因组5端有一个帽子结构(cap)，3端有一个Poly(A)尾。 现在已经测定了PEDV CV777株完整的基因组序列，大小为28 033 bp[4]。 目前除了人冠状病毒229E毒株(HCoV-229E)外，已知的其他冠状病毒成员都有Kozak序列，但是序列有所差异[5]。基因组序列包括6个ORF，从5→3依次为编码复制酶多聚蛋白lab、纤突蛋白、ORF3蛋白、小膜蛋白、膜糖蛋白和核衣壳蛋白的基因。在我国有不同于CV777疫苗株的新基因型的PEDV在流行，而他是否是CV777疫苗株的变异株， 还需要进一步的实验验证[6]。 实验室诊断方法 PED在临床症状上与猪传染性胃肠炎（TGE）极其相似，而通过临床症状很难鉴别出这两种病, 有时还会与猪轮状病毒共同感染。所以，通常用实验室诊断技术来检验是否是PEDV引起的腹泻。常用的实验室诊断技术有微量血清中和试验、免疫电