实验6：叶绿体中色素提取和分离11.ppt

实验6：叶绿体中色素的提取和分离 马山县周鹿中学 陆保宗 实验原理： ①叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于丙酮等有机溶剂中，所以用丙酮、无水乙醇等能提取色素。 ②层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体色素在层析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高，随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以用层析液来分离四种色素。 目的要求： 1、初步掌握提取和分离叶绿体中色素的 方法。 2、探究叶绿体中有几种色素。 实验材料用具： 1、材料：新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。 2、仪器：干燥的定性滤纸，烧杯(100mL)，研钵 玻璃漏斗，尼龙布（或棉花），毛细吸管，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺，量筒(10mL)，天平，镊子，铅笔，尺子。 3、药品：丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。 实验过程： 1、提取叶绿素的步骤?： （1）称：用天平称量5g除去叶柄的叶片 （2）剪：越细越好，尽量去除叶脉等部分 （3）加药品：加少量二氧化硅，碳酸钙和丙酮（约5mL）快速充分研磨。 （4）磨：研磨要领是要用力压快速研磨。 （5）过滤：用纱布（或棉花）、漏斗和试管，最后提取液置于试管中待用，及时用棉塞（或塞子）将试管塞严 . 2、分离色素的步骤 ①制备滤纸条：将预备在试验桌上的滤纸条一端剪去两个角作标记，在距离这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。 ②画滤液细线：沿铅笔线轻轻均匀地画一道线，用提取液反复划好几次，每次划完尽量吹干，不要弄破纸条。 ③层析分离叶绿体中的色素：将3mL层析液倒入烧杯中，注意将纸条画有滤液细线的一端置于烧杯中的层析液中，注意千万不要将滤液细线浸没在层析液中。 ④观察实验结果：最后滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。 实验结果： 显示：实验过程的动画 教师讲授实验过程 问题讨论： 1、加入SiO2、CaCO3的作用是什么？ 二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速；碳酸钙的作用是保护叶绿素不分解 2、 将滤液放在试管中，为什么要及时用棉塞将试管塞严？ 滤液含有丙酮，丙酮有毒，防止挥发 3、?画滤液细线时重复画几次的目的是什么？ 增加色素的含量，使分离后的色素带更加清晰 4. 为什么不能让滤液细线触及层析液？ 层析液会溶解色素使色素无法分离 。 5.观察实验结果有什么现象？滤纸条上出现了几条色素带？每条色素带的颜色和排序如何？ 滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素（最快）、叶黄素、叶绿素a（最多）和叶绿素b（最慢）。 实验关键: 1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片.(如菠菜叶) 随堂演练 ： 1.通过纸层析分离叶绿体色素，结果在滤纸条上出现四条色素带，从上到下依次为（ ） A.胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b B.胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素 C.叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素 D.叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素 2.下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验描述中，不属于实验要求的是 （ ） A.提取高等植物叶绿体中的色素 B.用纸层析法分离色素 C.了解各种色素的吸收光谱 D.验证叶绿体中所含色素的种类 3.用纸层析法将色素进行分离,在滤纸条上出现的最窄的一条色素带的颜色是 （ ） A.黄色 B.橙黄色 C.黄绿色 D.蓝绿色 4.提取叶绿体中的色素时要加丙酮，其原因是 （ ） A.让色素溶解 B.防止叶绿素被破坏 C.便于将叶片研磨成匀浆 D.促使叶绿体中色素分离 5.在叶绿体色素的提取和分离实验中，在滤纸条上扩散速度最快的色素是（ ） A.叶绿素a B.叶绿素b C.胡萝卜素 D.叶黄素 6.绿色植物的光合作用中，叶绿素是 （ ） A.光合作用的原料 B.光合作用的产物 C.能量转换器 D.氢的接受器 7.下列作用不属于叶绿素的功能的是 （ ） A.吸收光能 B.利用光能使水分解 C.利用光能合成ATP D.固定和还原二氧化碳 能力提高练习： (1)在圆形滤纸的中央，点上叶绿体色素的提取液进行层析，随着层析液从滤纸的中央向四周扩散，形成四个色素环带，排在最里圈的色素是（ ） A.橙黄色 B.黄绿色 C.蓝绿色