应用滚环扩增技术对白念珠菌耐氟康唑相关基因点突变的研究的开题报告.docx

应用滚环扩增技术对白念珠菌耐氟康唑相关基因点突变的研究的开题报告 1.选题背景： 白念珠菌是一种常见的真菌病原体，可引起多种感染，如皮肤黏膜感染、深部组织感染等。氟康唑是治疗白念珠菌感染的常用药物之一，但近年来已发现氟康唑耐药菌株的出现，严重制约了临床治疗效果。目前已有研究发现白念珠菌耐氟康唑的机制主要与其相关基因点的突变有关。为了更好地了解氟康唑耐药菌株，我们选择应用滚环扩增技术对白念珠菌的耐药相关基因点进行研究。 2.研究目的： 通过应用滚环扩增技术，对白念珠菌的耐氟康唑相关基因点进行分析，探究耐药机制，为制定更加有效的治疗方案提供科学依据。 3.研究内容： （1）对一系列白念珠菌菌株进行药敏试验，筛选出相应的耐氟康唑菌株。 （2）从耐药菌株中提取基因组DNA，设计特异性引物进行目标基因点的PCR扩增。 （3）构建滚环扩增反应体系，进行滚环扩增反应，扩增出目标基因片段。 （4）利用Sanger测序技术对扩增出的基因片段进行测序，检测是否存在突变。 （5）对突变基因点进行生物信息学分析，探究其在氟康唑耐药机制中的作用。 4.研究意义： 该研究可深入了解白念珠菌耐氟康唑的机制，对临床上治疗氟康唑耐药白念珠菌感染提供重要理论依据。同时，滚环扩增技术在检测细菌突变基因点方面具有高效、快速的优点，可为细菌突变基因的鉴定和临床病原微生物分子诊断提供依据。