5-FAM 蛋白标记试剂盒 - 凯基生物.PDF

5-FAM蛋白标记试剂盒 CatNumber：KGYGD202 ForResearchUseOnly Storeat4℃foroneyear Expiredate： 一、 试剂盒说明 本试剂盒为5-FAM标记蛋白提供了非常便捷的标记方法。5-FAM 5-Carboxyfluorescein）是最常用于标记蛋白的绿色 荧光探针之一。5-FAM激发波长 495nm），发射波长 520nm），与FITC类似。但与FITC不同的是，FITC与蛋白质结合的 硫脲并不稳定，会导致结合久的荧光蛋白释放出游离的荧光基团。5-FAM中的琥珀酰亚胺酯与氨基基团反应形成稳定的酰 胺键，5-FAM在免疫荧光染色、原位荧光杂交、流式细胞术等其他生物学实验中的应用效果要优于FITC。 二、 试剂盒组份 组份 KGYGD202-1 3个标记反应） 储存温度 5-FAM SE 3管 Reaction buffer 0.5 mL Desalting column 3 根 4℃ DMSO 1 mL 10X lution buffer 30 mL 三、 操作步骤 1、 准备蛋白质溶液：按体积比1：10的比例将reaction buffer加入到您的目标蛋白溶液(2~10mg/mL)中。 2、 准备染色液：将 20uLDMSO 加入到整支5-FAMSE中，即为10mg/mL染色液 21mM），可配合涡旋震荡将染料完 全溶解。 3 =10 1 、 进行结合反应：对于抗体来说，推荐的分子摩尔比例为染料：蛋白 ： ，对于其他非抗体类蛋白，通常使用的这 2 1~20 1 一数值为 ： ： 。 3.1 150KDa IgG 加染色液至您的样本蛋白溶液中，彻底混匀。对于抗体来说可参照如下表格进行操作 以分子量 的 为例）： IgG 染色液 0.5mg 1.6uL 1mg 3.2uL 1.5mg 4.7uL 2mg 6.3uL 2.5mg 7.9uL 3mg 9.5uL 3.5mg 11.0uL 4mg 12.6uL 4.5mg 14.2uL 5mg 15.8uL 3.2 15 ~60 室温避光摇动反应混合物 分钟 分钟。 4 6000