液相色谱仪日常维护和故障排除..ppt

xx/xx/xxxx ? Merck Editor: Presentation name here xx/xx/xxxx ? Merck Editor: Presentation name here 1 由强到弱 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水 (或缓冲溶液)进行试 验， 这样可以 很快地得到分离结果，然后根据出峰 情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。 2 三倍规则 每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈) 的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规 则。这是一个聪明而又省力的办法。调 整的过程中，注意观察各个峰的分离情况。 3 粗调转微调： 当分离达到一定程度，应将有机溶 剂10%的改变量调整为5%，并据此规则逐 渐降低调整率，直至各组分的分离情况 不再改变。 出现“鬼峰” 解决问题 可能原因 上一针样品中没有完全流出的物质 样品中未知的组分 色谱柱被污染 溶剂中有杂质 流动相和溶解样品的溶剂不互溶 三氟乙酸被氧化 解决办法 待样品中的组分尽可能完全流出后才进下一个样品； 每运行完一个样品后用强极性的溶剂冲洗色谱柱； 改进样品的预处理；组分复杂的样品尽可能使用 梯度解吸的方法 改进样品的预处理 每运行完一个样品后用强极性的溶剂冲洗色谱柱； 改进样品的预处理 使用色谱纯的溶剂 尽可能用流动相溶解样品 流动相尽量每天新配；使用三氟乙酸时，应 使用抗氧剂 出现肩峰或 前延峰 解决问题 可能原因 预柱被污染或选用了不合适的预柱 柱头“塌陷”造成死体积或是 柱子内部有短流出现 溶解样品的溶剂选择错误 干扰物质的存在；样品中的杂质 色谱柱过载 柱外效应的影响 解决办法 更换预柱 更换色谱柱 用流动相溶解样品，如果不可以，应将 进样体积降至很低（如1微升） 改进样品预处理；用测试的混合物 检验色谱柱；使用色谱纯溶剂 将样品稀释 检查毛细管连接 峰形展宽 解决问题 解决办法 更换色谱柱或预柱 减少进样体积；稀释样品 用流动相溶解样品 使用浓度稍高的缓冲溶液或者 换用其它的缓冲溶液 检查毛细管连接 检查是否有漏；使用小的检测池 提高色谱柱温度 使用内径较细的较短的毛细管连接； 检查柱外死体积 使用较小粒径填料的色谱柱； 更换色谱柱 可能原因 色谱柱或预柱被污染或不合适 色谱柱“过载”或进样体积过大 溶解样品的溶剂选用不当 缓冲溶液的浓度太稀 柱外效应的影响 色谱柱和检测器之间有漏； 检测器的检测池过大 色谱柱温度太低； 流动相的黏度太高 连接用的毛细管太长； 柱外死体积太大 色谱柱柱效下降 出现脱尾峰 解决问题 解决办法 减少样品体积； 增大色谱柱内径； 使用高容量的固定相 改进样品预处理； 调节流动相的组成； 使用测试样品混合物检查色谱柱； 使用色谱纯溶剂 使用流动相改性剂（如三乙胺）； 提高缓冲溶液或盐溶液的浓度（离子对色谱） 降低流动相的pH值； 使用碱性去活的色谱柱 更换滤网；使用柱前过滤系统； 将样品过滤 检查毛细管连接 更换色谱柱； 使用性质较温和的分离条件 可能原因 色谱柱过载 干扰峰；杂质 硅胶表面未完全键合的硅羟基的影响 色谱柱的滤网堵塞 柱外效应的影响； 死体积 色谱柱有“塌陷”、短流或断流 出现双重峰或 分叉峰 解决问题 可能原因 样品体积过大； 色谱柱过载 溶解样品的溶剂选用不当 色谱柱有“塌陷”、短流或断流 色谱柱滤网堵塞 进样器没有彻底清洗 解决办法 减少进样体积； 稀释样品； 将样品在流动相中溶解；如果不行， 尽可能将进样体积降低（如1微升） 更换色谱柱； 使用较温和的分离条件 更换色谱柱的滤网； 使用柱前过滤装置； 过滤样品 彻底清洗进样器； 更换进样器转子 保留时间变长 解决问题 可能原因 流速降低 硅胶表面有活性点 键合相流失 流动相的组成有变化 温度降低 解决办法 检查系统是否有漏； 更换泵的密封圈； 排净气泡； 使用流动相改性剂（如加入三乙胺）； 使用碱性去活的色谱柱 保持流动相pH值在2-7.5 范围内 检查泵；检查滤网； 防止流动相的挥发或降解 使用色谱柱恒温箱 保留时间缩短 解决问题 可能原因 流速升高 色谱柱过载 键合相流失 流动相组成发生变化 温度升高 色谱柱老化 解决办法 检查泵；检查流速 降低样品的浓度或进样体积 流动相的pH值保持在2-7.5 范围内 检查泵；检查滤网； 防止流动相的挥发或降解 使用色谱柱恒温箱 更换色谱柱； 使用预柱 保留时间 无规则改变 解决问题 可能原因 流速发