凝血、止血机理与血凝仪器测定方法综述.pdf

维普资讯 维普资讯 学装备2007年 12月第 4卷第 l2期 凝血 、止血机 Lj血凝仪器测定方法综述——杨 进 等 时没有沿陛，仅在凝血开始后被激活。此外，所形成 判断血浆凝固终点的方法。 的纤维蛋 白还要适时地被体 内正常存在的纤溶系 使用光学法检测时，一般是将预温好的待检血 统所溶解 ，以保证血液畅通和机体的正常功能。 浆标本和试剂快速混合，在混合瞬间吸光度非常 由此可见，凝血的过程是非常复杂的。医学上 弱，随着样品和试剂混合物中的纤维蛋 白凝块的形 一 般用瀑布学说来解释。简单的瀑布学说就是 ：凝 成 ，反应杯 内标本吸光度逐渐增强，当标本凝固完 血有 内源和外源两条途径和四个关键步骤 ：(1)启 全后 ，吸光度值就稳定下来 ；仪器在血浆和试剂混 动；(2)血液凝血活酶形成，(3)凝血酶形成；(4)形 合的的瞬间，也就是吸光度最弱时，设定吸光度值 成稳定的纤维蛋白。 A=0％，在血浆和样品凝 固完全后，吸光度最强时， 在血管损伤时，凝血机制被启动，人体 内含有 设定吸光度值A=100％；在0％～100％吸光度变化之 的多种天然抗凝物，会被激活成具有酶活性的凝血 间，仪器检测通道单位时间内分别采集多个数据， 因子。血凝检测可以测定重要的天然抗凝物，如(1) 这样吸光度的变化值可做出一条曲线，仪器根据实 抗凝血酶～111(AT一111)；(2)凝血酶调节蛋 白、蛋 白C 验项 目需要 自动选取 曲线上的一点所对应的时问 和蛋 白S(PC、PS)；(3)肝素辅因子 II(HC—II)等等。 为凝血时问；仪器 内的计算电路对做出的曲线求二 血栓／止血实验中还包括纤维蛋 白溶解系统，有 次微分，二次微分为零的点，就是凝固终点；因为凝 些先进的血凝仪器可以进行多项 目测定包括纤维 血是一个酶促的加速过程，到凝固终点时，反应速 系统的一些物质 。纤溶与凝血过程一样 ，是由一系 度和加速度都达到最大，此时凝固曲线的二次微分 列因子参与，依次激活并逐级放大的一个系统。主 为零。如凝血测定常规项 目中的凝血酶原时间(PT) 要测定的物质有 ：(1)纤溶酶原PLG，又称血浆素 的测定，就是在待测血浆中加人过量的因子 III和 原 ；(2)激肽释放酶原 PK；(3)高分子量激肽原 钙离子，使血浆发生体外凝固，在凝固过程中纤维 HMWK；(4)尿激酶原；(5)纤溶酶原激活物APA、 蛋 白原逐渐变成纤维蛋 白，其理化性会发生改变， (6)尿激酶UK等。还包括纤溶系统中存在的多种 使得仪器透射光的强度也会发生改变，仪器 CPU电 抑制因子，如：(7)纤溶酶原激活物抑制剂PAI；(8) 路会 自动根据光强度的变化来判断血浆凝固所需 纤溶酶抑制物。 要的时间。 凝血 、抗凝 、纤溶 以及纤溶抑制是既相互对抗 仪器在测定待测血浆样品前，必须首先定标 ， 又相互依存的复杂体系，其问是互相交叉 ，关系错 也就是对 已知浓度或活性的标准品的凝血时问进 综复杂，在正常情况下维持动态平衡。如果一方面 行测定，并以已知浓度或活性的标准品所对应的凝 发生异常即会打破平衡，导致出血或血栓形成，如 血时间来制定标准曲线；在检测待测样品时，计算 出血，除了血小板和血管因素之外，可能是凝血因 电路首先检测出标准品的凝 固时间，再根据凝 固时 子先天或后天缺乏 ，也可能是抗凝物质过少，或者 间从标准曲线上求出浓度或潘眭。 是纤溶亢进。而血栓性疾病，则会是天然抗凝物质 2．2 免疫学方法 该法是以要检测的血浆中物质 缺乏或对抗凝物质有抗性 ，也可能是