SN_T 4081-2014伤残短体线虫检疫鉴定方法.pdf

S-中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4081—2014伤残短体线虫检疫鉴定方法Detection and identification of Pratylenchus vulnus Allen Jesen2015-05-01实施2014-11-19 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局刮涂层查真 SN/T 4081-2014前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国宁波出入境检验检疫局、中华人民共和国伊犁出入境检验检疫局。本标准主要起草人：龙海、李一农、王金成、李芳荣、顾建峰、乾义柯。I SN/T 4081—2014伤残短体线虫检疫鉴定方法1 范围本标准规定了进出境植物检疫中伤残短体线虫的检疫鉴定方法。本标准适用于进出境植物及植物产品、土壤等传带的伤残短体线虫的检疫鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T2757植物线虫检测规范3　符号下列符号适用于本文件。测计的线虫样本数目；nL虫体体长（μm或mm）；体长/最大体宽；26体长/虫体前端至食道与肠连接处的距离；b体长/体前端至食道腺末端的距离；体长/尾长；尾长/肛门处体宽；引带长度；gubernaculums-St-口针长度（μm）；-交合刺长度；spicule--一泄殖腔开口至精巢末端的距离×100/体长；TV--虫体前端至阴门的距离×100/体长。4方法原理中文名称：伤残短体线虫学名:Pratylenchus vulnus Allen .Jesen,l951异名:Anguillulina pratensis Thorne,1934Pratylenchus musicola Condit . Horne,1938Pratylenchus pratensis Allen,1949;Serr.Day,1949英文名:Walnut meadow nematode;Walnut root-lesion nematode分类地位：线虫门（Nematoda）、侧尾腺纲（Secernentea）、垫刃目（Tylenchida）、短体科（Pratylenchi-dae）、短体亚科（Pratylenchinae）、短体属（Pratylenchus）。伤残短体线虫是内寄生性线虫，通常破坏寄主植物根系的外层组织，随着线虫的取食，根系细胞大1 SN/受损，从出现大面积病变的根系中可分离到线虫。受害植株须根减少，根系不发达，若有其他病原物，将导致根系腐烂。伤残短体线虫危害80余种植物。根据寄主范围、传播途径、生物学和形态学特征进行该线虫的检疫鉴定。伤残短体线虫的寄主范围、地理分布和传播途径参见附录A。5仪器、用具和药品5.1仪器与用具光学显微镜、体式显微镜、冰箱、加热板、打孔器、载玻片、盖玻片、标准套筛（60目～500目）、烧杯（500mL、1000mL）、漏斗、漏斗架、乳胶管、止水夹、凹玻片、剪刀、挑针、浅盘、玻璃纤维丝、酒精灯、培养皿、试管、纱布、干燥器、记号笔。5.2药品指甲油、4%甲醛、乳酚油（苯酚20mL、乳酸20mL、甘油40mL和蒸馏水20mL混合而成）、石蜡、冰乙酸。6检疫与鉴定6.1现场检疫与取样对植物及其产品的根、鳞球茎、块茎、根状茎等地下部分进行检查，是否有根腐症状。收集上述可疑植物材料及所附带的土壤，送实验室检验。6.2实验室检验对于抽取的样品，可用浅盘分离法或漏斗法分离线虫，具体操作过程见SN/T2757。对于少量的植物样品，直接在体视显微镜下用解剖针对样品进行解剖。将线虫分离液在体视显微镜下检查，挑取或吸取疑似线虫若干条，制成临时玻片在显微镜下镜检，观察线虫的形态。线虫临时玻片标本制作方法见SN/T 2757。7伤残短体线虫的形态学鉴定特征7.1形态特征图形态特征见附录B。7.2形态特征描述雌虫：虫体细长，温和热杀死后虫体直伸，头区高连续，唇区有34条环纹。口针发达，基部球圆形，有时前端呈杯状；中食道球椭圆形，较窄；排泄孔位于食道与肠交界处；食道腺从腹面以长叶状覆盖肠的前端。受精囊充满精子时呈长椭圆形，具长的和分化的后阴子宫囊，长度为阴门处体宽的2倍，侧区具4条侧线，外侧的侧线光滑或略呈锯齿状，中间2条侧线距离较近。尾圆锥形，尾尖细圆或亚锐尖光滑，偶尔具1～2条环纹。雄虫：常见，头区和食道的构造与雌虫相似。侧区在交合伞处终止，交合伞延伸到尾尖。交合刺弯曲，引带简单。2 SN/T4081-—20147.