PCR在转基因中的应用.doc

PCR技术在转基因食品中的应用 (石河子大学食品学院 农产品加工及贮藏专业，李珍 新疆 石河子 832000) 摘要：转基因食品近年来，已经成为公众争论的焦点。本文概述了转基因食品国内外发展现状及在转基因食品安全性基础上，提出了其检测方法—PCR技术，并重点介绍了PCR技术在转基因食品检测上的应用及发展趋势。 关键词：PCR；转基因食品；食品检测 PCR Technology In Genetically Modified Food Abstract:Genetically modified foods in recent years has become the focus of public debate.This article summarizes the current situation and the development of the genetically modified foods in domestic and foreign on the basis of safety,Introduce the detection method-PCR technology, And focus on the application of PCR technology and development trends in the detection of genetically modified foods. Key words:PCR; Genetically Modified Food;Food Testing 随着我国食品科学技术的发展及现实的需要，食品检测和分析也在不断进步，特别是面对迅猛发展的转基因食品，安全问题逐渐被人们所重视，转基因食品是否安全，转基因食品标识制度能否被严格执行，关键在于是否有准确，可靠的检测技术作保障。PCR技术是1985年诞生的一项DNA体外扩增技术，该技术自问世以来就备受食品科学领域的青睐，在食品转基因成分检测方面具有很大的潜在价值。 PCR技术又称基因扩增技术，是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）的缩写，该技术在转基因食品检测的应用过程中表现出灵敏度高、速度快、特异性强、简便、高效等特点，是转基因食品检测的重要手段之一[1]。 1 PCR技术基本原理 类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成。 ① 模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备。 ② 模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。 ③ 引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。 到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝[2]。 2转基因食品国内外的发展现状 转基因食品始于20世纪70年代初，美国开展转基因食品方面的研究最早,但是美国国内的转基因食品的消费是禁止的。就种植面积而言，转基因作物排序为大豆、玉米、棉花、油菜、马铃薯[3]。我国的转基因食品的研究和开发居世界中等水平,在大田试验和商品化方面仅次于美国和加拿大。1999年3月,中国水稻研究所研制的属世界首创的“转基因杂交稻”研究成果通过专家鉴定,9月华中农业大学的一项转基因水稻通过鉴定，并且达到国际先进水平。转基因动物研究方面， 我国在鱼/兔、鸡、羊等方面取得了突破性的进展。目前，转基因动物商品化未见报道[4]。转基因动物的安全评价方案国内外已经有了研究报道。 相对美国对转基因的态度，欧盟对转基因食品的态度相对保守。欧盟允许种植的转基因作物只有大豆、玉米和油菜等，种植面积仅占世界转基因作物面积的0.3％最近，欧盟又根据高质量的科学评价，对转基因食品进行了更加严格的管制措施，以便更好的保障人类健康以及环境的安全[5]。我国目前对转基因的态度是科研支持，转基因食品的消费也没有限制，只是要求生产者如果采用了转基因原料在食品包装上必须标明。至于选择与否，由消费者自己决定。 3 转基因食品的安全问题 面对越来越多的转基因食品，人们的认识并非一致，以美国为首的主吃派和欧洲为首的反对派在全球范