兽医微生物学讲述.ppt

1999\12\28 计算机应用技术学习内容提要 计算机应用技术学习内容提要 天津市教委（试行） 兽医微生物学 (多媒体教学课件) 天津农学院动科系动物预防医学教研室制作 2003/02/28 四、各类Ig的主要特性与功能 1. IgG 是人和动物血清中含量最高的Ig (表8-4-102)，占血清Ig总量的75％-80％。IgG是介导体液免疫的主要抗体，多以单体形式存在。 产生与分布 IgG主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞产生，主要在血浆中（占75％-80％），其余存在于组织液和淋巴液中。IgG是惟一可通过人(和兔)胎盘的抗体，在新生儿的抗感染中起重要作用。 IgG的功能 IgG可发挥抗菌、抗病毒、抗毒素以及抗肿瘤等免疫学活性，能调理、凝集和沉淀抗原，与抗原结合后能结合补体。 第八章 2. lgM 是动物机体初次体液免疫应答最早产生的Ig， IgM是由五个单体组成的五聚体，是所有Ig中分子量最大的。 产生与分布 IgM主要由脾脏和淋巴结中B细胞产生，只分布于血液中，仅占血清lg的10％左右。IgM在体内产生最早，在抗感染免疫的早期起着十分重要的作用。 IgM的功能 早期抗感染免疫，具有抗菌、抗病毒、中和毒素等免疫活性。 第八章 第八章 3. IgA 以单体和二聚体两种分子形式存在。单体存在于血清中，称为血清型IgA，约占血清Ig的10％-20％；二聚体为分泌型IgA。 产生与分布 分泌型IgA是由粘膜固有层中的浆细胞所产生。主要存在于各种分泌液中。分泌型IgA对机体呼吸道、消化道等局部粘膜免疫起着相当重要的作用，可抵御经粘膜感染的病原微生物。在传染病预防中，经滴鼻、点眼、饮水及喷雾途径免疫，均可产生分泌型IgA而建立相应的粘膜免疫力。 IgA功能 具有抗菌、抗病毒、中和毒素等免疫活性，双体IgA具有重要的局部粘膜免疫功能。 第八章 4.IgE IgE的产生部位与分泌型IgA相似，在血清中的含量甚微。IgE是一种亲细胞性抗体，易与皮肤组织、肥大细胞、血液中的嗜碱性粒细胞和血管内皮细胞结合，可介导I型过敏反应。 IgE在抗寄生虫、某些真菌感染方面也有重要作用。 5.IgD 很少分泌，在血清中的含量极低，而且不稳定，容易降解。 IgD分子量为17-20万。 IgD主要作为成熟B细胞膜上的抗原特异性受体，是B细胞的重要表面标志。此外IgD与免疫记忆与某些过敏反应有关。 五、 抗体的制备 （一）人工制备抗体的种类 1. 多克隆抗体(PcAb) 采用传统的免疫方法，将抗原物质经不同途径进入动物体内，经免疫后，分离出血清，由此获得的抗血清即为多克隆抗体。细菌病毒抗原，均是由多种抗原成分组成，即使纯蛋白质抗原分子也含有多种抗原表位，因此进入机体后可激活许多淋巴细胞克隆，机体可产生针对各种抗原成分或抗原表位的抗体，由此获得的抗血清是一种多克隆的混合抗体，具有高度的异质性。 一只小鼠能产生约107-108 种不同抗体，人约109种。 第八章 2. 单克隆抗体(McAb) 由一个B细胞分化增殖的子代细胞(浆细胞)产生的针对单一抗原决定簇的抗体，称为单克隆抗体。 McAb的特点 McAb的重链、轻链及其V区独特型的特异性、亲和力、生物学性状及分子结构均完全相同。 McAb技术原理 用人工的方法将产生特异性抗体的B细胞与同系骨髓瘤细胞融合，形成B细胞杂交瘤细胞，这种杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞无限繁殖特性，又具有B细胞分泌特异性抗体的能力，由克隆化的B细胞杂交瘤所产生的抗体即为单克隆抗体。 第八章 单克隆抗体的问世，极大地推动了免疫学及其他生物科学的发展，并于1984年获得诺贝尔奖。 McAb优点 与多克隆抗体比较， McAb具有无可比拟的优越性，具有高特异性、高纯度、均质性好、亲和力不变、重复性强、效价高、成本低、并可大量生产等优点。 （二）B细胞杂交瘤株建立与McAb生产技术 基本过程 B细胞的制备、骨髓瘤细胞的制备---细胞融合---检测抗体--杂交瘤细胞的克隆化---细胞株冻存或单克隆抗体的生产 。 第八章 第八章 (1) B细胞的制各 可用提纯的抗原免疫Balb/c或其他品系小鼠，免疫2-3次间隔2-4周，最后一次免疫后3-4d，取小鼠脾脏，制成103/ml的脾细胞悬液，即为亲本的B细胞。 (2) 骨髓瘤细胞的制备 用与免疫相同品系小鼠的骨髓瘤细胞，要求其本身不能分泌Ig，而且具有某种营养缺陷，可用SP2/0或NS-1，它们缺少次黄膘吟--鸟膘吟磷酸核糖转移酶，不能在HAT培养基上生长。 (3) 饲养细胞的准备 常用小鼠巨噬细胞或胸腺细胞作为饲养细胞。 第八章 (4) 选择培养基