外切葡聚糖酶.pdf

网络出版时间：2014-01-15 15:23 网络出版地址：/kcms/detail/11.1946.TQ1523.009.html 外切-β-葡聚糖酶基因重组里氏木霉的筛选及其产酶性能 孔芹，方浩，夏黎明 （浙江大学 生物质化工教育部重点实验室，化学工程与生物工程学系,浙江，杭州 310027 ） 摘要：外切-β-葡聚糖酶是纤维素酶的重要组分之一，提高该组分的活力是增强纤维素酶协同降解性能、降低纤维素水解成 本的关键。本文分别采用微晶纤维素琼脂平板法和滤纸崩解法，对已有的基因重组转化子进行筛选试验，获得了 6 个优良转 化子，其滤纸崩解速率和微晶纤维素琼脂平板上的生长速率都较大。进一步在摇瓶条件下进行复筛试验，获得了外切-β-葡 聚糖酶（C -1 ）高产转化子 Trichoderma reesei ZU-101,液体培养 48 h ，其 C 酶活力可达 18.24 U·mL ，是出发菌株的 2.16 1 1 倍；分析结果表明：重组转化子的纤维素酶体系中内切-β-葡聚糖酶和纤维二糖酶的活力与出发菌株相比变化不大，但由于 外切-β-葡聚糖酶活力得到了大幅度提高，纤维素酶的总活力（滤纸酶活力 FPA ）也提高了 61.9% 。采用纤维素酶对碱预处 理玉米秸秆进行酶解试验，当酶用量为 20 FPIU·g-1 底物，水解 48 h ，重组转化子 T.reesei ZU-101 纤维素酶的酶解得率高达 94.4% 。本文的研究结果在可再生纤维素资源的生物转化与利用方面具有广阔的应用前景。 关键词：重组里氏木霉；外切-β-葡聚糖酶；转化子筛选；玉米秸秆；酶水解 中图分类号： TQ920 文献标志码：A 文章编号：0438-1157（2013）00-0000-00 Screening and cellulase production of recombinant Trichoderma reesei with high activity exo-β-glucanases KONG Qin,FANG Hao,XIA Li-ming (Key Laborotary of Biomass Chemical Engineering of Ministry of Education, Department of Chemical Engineering and Bioengineering, Zhejiang University, Hangzhou310027, Zhejiang, China) Abstract: Increasing the activities of exo-β-glucanases, one of the important components of cellulase, is a key to strengthening the synergistic degradation of cellulase and reducing the cost of celluloly