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猪体细胞核移植转基因技术的研究的中期报告
根据研究进展,本研究已经完成了以下工作:
1. 筛选合适的猪体细胞:经过多次尝试,我们发现成年猪的皮肤细胞是最适合作为核移植的供体细胞的。使用酶消化方法获得单个细胞,然后通过培养和筛选,得到了一批高质量的猪体细胞。
2. 提取并准备外源基因:我们选择了一种能够抗病毒的基因,并利用PCR方法扩增得到了该基因的DNA片段。随后,将该片段克隆到质粒载体中,并经过UC纯化获得高纯度的外源基因。
3. 转染及筛选:选择一种先进的基因转染技术,将外源基因载体转染到猪体细胞中,随后通过筛选得到有外源基因表达的细胞群。
4. 核移植:根据猪体细胞筛选结果,选取表达外源基因最好的细胞作为供体细胞。随后进行体细胞核移植,将该供体细胞的细胞核注入到受体卵细胞中,并进行电融合。
5. 体外培养和移植:经过短暂的体外培养,得到了多个转基因胚胎。随后将这些胚胎移植到代孕母猪体内,希望能够获得出生健康的转基因猪。
当前工作的计划包括:继续追踪并评估代孕母猪的怀孕情况、胚胎发育情况和新生猪的健康情况。同时,进一步深入研究影响转基因猪成活率和生殖能力的关键基因,以期在未来更好地利用这一技术。
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