掌握精子形态的分类和分析方法.ppt

* * 家畜的精液品质检查 实验目的 掌握精子密度计数法测定精液密度方法； 掌握精子形态的分类和分析方法； 掌握精子活力测定方法。 实验材料 材料：新鲜公猪精液 器械及用品：显微镜、载玻片、玻棒、0.9%Nacl溶液、95%和75%的酒精、染色缸、3%盐水、红墨水、血球计数板、计数器、5ml试管、移液管（50ul、1000ul）。 畸形精子形态图 实验内容 1、精子密度计数板(器)简介 精子计数室长宽各1mm,面积1mm2高度0.1mm,体积0.1mm3 由双线或三线组成25个(5X5)中方格 每个中方格内有16个小方格(4X4) 共计400个小方格 （一）精子的密度检查 精子计数室及一个中方格 进行精子计数的中方格数可以是四角一中心共5个中方格 也可以是从左角到右下角五个中方格 以图示次序计数，精子的头部为准，依数上不数下，数左不数右的原则进行计数格线上的精子。白色精子不计数 2、计算精子密度 精子密度=5个中方格总精子数×5×10×1000 × 10倍 注意：为了减少误差，必须进行2-3次计数，求出平均数，即为所确定的精子数。 3.猪精子密度测定程序 放计数板 于载物台上 取样稀 释精液 精液注入 计数室 镜检 精子计数 密度计算 计数板和盖玻片一定要清洁 取1800ul 3%氯化钠于小试管中,加入200ul原精液,混合均匀 取25ul小心地从计数板与盖玻片的接缝中加入,使其自行吸入计数室中 用100倍和400倍观察 计数五个中方格的总精子数,计数以头部为准,在格线上的数上不数下,数左不数右 精子密度= 5个中方格总精子数5×10×1000 × 10 1、精液抹片的制作。 2、将抹片放于空气中或用酒精灯烘干燥。 3、置于95%酒精中固定5-6分钟，取出以水冲洗后，凉干或烘干， 4、用红墨水染色3-5分钟，再用水冲洗，干燥后置于显微镜下检查。 5、镜检：将载玻片放在400或600倍的显微镜下进行观察，共记录若干个视野中100-200个左右的精子 （二）畸形率检查 精子的畸形率=畸形精子数/总精子精×100% *