儿科抗生素使用现状调查分析毕业论文.ppt

小结 发育阶段的变化是光滑鳖甲抗冻蛋白基因表达的重要调节因素。通过对光滑鳖甲幼虫在不同发育阶段抗冻蛋白水平变化的研究发现，老熟幼虫（8-9龄）Apafps 的转录和体液渗透浓度都达到峰值，这说明老熟幼虫可能对寒冷有更强的耐受能力。 3.2 不同发育阶段的光滑鳖甲幼虫在低温下存活率与AFP基因转录水平的变化规律 将样本分为三组：小龄期幼虫100条(1-3龄);中龄期幼虫30条(4-6龄);大龄期幼虫18条(7-9龄).每组分瓶放置于4度环境下,处理12h后室温恢复30min,与处于室温下的对照组相比对，统计其存活率,并对存活幼虫提取RNA,进行Real-time PCR分析.提取RNA时以总重相同为原则，小龄期幼虫每20条为一处理组,中龄期幼虫每2条为一处理组,大龄期幼虫每一条为一处理组,进行RNA的提取. 3.2.1 低温处理前后不同发育阶段幼虫的存活率 存活率（%） 小龄期幼虫(1-3龄)，存活率为64%；中龄期幼虫(4-6龄)，存活率为77.8%； 大龄幼虫和蛹全部存活 3.2.2 低温胁迫下不同发育阶段的光滑鳖甲幼虫RNA的提取结果 低温处理前光滑鳖甲各龄期RNA提取结果. 3.2.3 低温处理前后不同发育阶段幼虫Apafps转录水平的变化规律 在低温胁迫下小龄，大龄和蛹的mRNA水平都无显著变化，只有中龄（4-6龄)幼虫AFPs的表达显著提高. 小结 结果显示冷胁迫能促进幼虫AFPs的累积，这表明抗冻蛋白基因表达存在发育阶段差异性。环境低温对光滑鳖甲幼虫抗冻蛋白基因表达也有一定程度的影响，同时在低温下不同龄期幼虫的存活率也有区别，结合Apafps基因表达、低温存活率和野外采集时观察的结果可以推测光滑鳖甲大龄幼虫可能是一种过冬虫态。 第四部分 光滑鳖甲天然抗冻蛋白的分离纯化初探 儿科抗生素使用现状调查分析 Pediatric Antibiotics Present  Situation Investigation and Analysis 答 辩 人: 专 业 : 生物技术 指 导 老 师 : 学院本科毕业论文答辩 安阳工学院生物与食品工程学院 2013.5.26 研究背景 长期以来，提高棉花产量品质一直是棉花育种工作者研究中的主攻目标，上世纪80年代以前，棉花育种工作者把主要精力集中在产量的提高上，而忽略了纤维品质的改良，使得我国自育的栽培品种虽然高产，但品质较差，并由于长期的种内杂交，使得我国陆地棉遗传背景狭窄。随着纺织工业技术的发展以及人民生活水平的提高，对棉花纤维品质的要求愈来愈高，急需能纺高质纱的棉纤维。 作为重要纺织工业原料，陆地棉纤维长度、强度、细度等品质差。海岛棉纤维品质优良，抗黄萎病，但产量低。将海岛棉优良性状基因导入陆地棉栽培品种中，可拓宽陆地棉遗传背景、有效解决棉花育种瓶颈，对同步改良棉花产量和纤维品质具有重要意义。 技 术 路 线 提取体液 田间采集 棉花嫩叶 样本 提取DNA 环境因子的影响 预处理 阳离子交换 透析、浓缩 活性检测 天然抗冻蛋白 分离纯化初探 低温 干旱 温度变化 体液渗透浓度 的检测 数据分析 光滑鳖甲抗冻 蛋白表达规律 研究内容 本研究分为以下四个方面： 光滑鳖甲抗冻蛋白的季节性表达规律 环境因素对光滑鳖甲抗冻蛋白表达的调节 不同发育阶段和低温对光滑鳖甲幼虫抗冻蛋白表达的影响 光滑鳖甲天然抗冻蛋白的分离纯化初探 第一部分 光滑鳖甲抗冻蛋白的季节性表达规律 1.1 样本的采集 样本的采集地点为沙漠边缘地带，这里具有降水量十分稀少，昼夜温差较大，气温变化剧烈的特点。而生活在这种较为极端环境下的荒漠昆虫只能通过战胜长时间的低温，经受剧烈的温度变化，并在夏日克服干旱和高温的影响才能生存下来。光滑鳖甲就是其中的一种。我们记录了采集时间内全年的温度变化，见下图： 2008年三月至2009年1月全年日最高温及最低温变化图，夏季温差较 大而冬季温差较小 1.2 热滞活性(TH)的测定 将提取的昆虫体液通过Fiske? Micro-Osmometer测定其渗透浓度值（Fp），然后将同一样品用蛋白酶K处理后，再次测定渗透浓度值（Mp），求得两者之间的差值，并通过以下公式计算，其中TH为热滞活性值。 TH=(Fp-Mp)×1.858×10-3 1.3 基因的选取 实验室前期研究中得到了5个光滑鳖甲抗冻蛋白基因，我们选取其中两个具有不同结构特点的基因Apafp752和Apafp914研究其表达规律。 前期研究报道显示很多昆虫抗冻蛋白在核心保守区都存在TCT这一特殊结构，而这一结构被认为是AFP与冰的结合点。根据序列比对结果，我们选取正常序列