植物花药培养和单倍体育种.ppt

植物花药培养和单倍体育种 ----------生技3091 单倍体育种 单倍体：是指具有配子染色体组成的细胞或个体 获得单倍体的途径 1，花药培养：把整个花药接种到培养基上，在离体培养条件下，使其小孢子诱导形成单倍体的孢子体。 2，花粉培养：是把花粉从花药中分离出来接种到培养基上，在离体培养条件下，诱导形成单倍体的孢子体。 3，远缘杂交授粉：利用远缘杂交不亲和，刺激卵细胞单性发育的特点，通过亲缘关系较远的种间或属间杂交，有时可获得少量的单倍体。 hui 4，延迟授粉：去雄后延迟授粉，可以提高孤雌生殖的发生频率. 5，照射花粉授粉：花粉经X射线处理后，给去雄的母体授粉，可诱发单倍体的产生。 6，化学处理：用一些化学药剂处理花柱，柱头或子房可诱导单倍体的产生。 单倍体植株的染色体加倍 1：自然加倍，在诱导形成单倍体植株的过程中，往往一些植株会自然加倍。 2：人工诱导加倍，最好的方法是用秋水仙素溶液处理。 3：从愈伤组织再生二倍体植株：单倍体愈伤组织过程中会有一定频率的核内有丝分裂及花粉核的融合，形成二倍体细胞。 植物花药培养 1,材料欲处理: 接种钱将采集的花蕾或花序以理化方法处理能提高花粉植株诱导频率。处理方法有低温、离心《花药》、低剂量辐射、化学试剂《如乙烯利》处理等。低温处理可阻止小孢子正常分化，使停留于单核状态的花粉显著提高，有利于诱导分化愈伤组织和胚状体。 2 2，表面消毒： 由于花蕾未开放，花药是无菌或半无具备状态，因而消毒程序较为简便。 在无菌条件下，先将花蕾用70%酒精浸泡30S左右，再用0.1%氯化汞表面消毒8-10 min或用1%的次氯酸钠消毒10-15 min，然后用无菌水冲洗3-5次。 fmvkls 3，接种 在超净工作台上用镊子剥去部分花冠，露出花药，夹住花丝取出花药置于培养皿中，或用接种环蘸取花药接种于培养基上。接种密度宜高，以促进“集体效应”的发挥，有利于提高诱导率。 注意： 1,尽量避免损伤花药，以免从受伤处产生药壁愈伤组织。 2，注意彻底去除花丝部分，因为接种与花丝相连的花药时，往往不利于花药内小孢子的启动，以及愈伤组织或胚状体的形成。 nkl 4，培养 1，花药中的花粉形成遇上组织，遇上组织再分化诱导成苗。 2，花粉分化成胚状体而直接成苗。 大部分植物花药接种后，置于25-28度温度下，光暗交替条件下为宜，光强2000-10000lx,光照时间12-18h. 5,植株的诱导 愈伤组织分化芽或根，需将其转至分化培养基或生根培养基。可先诱导芽，待形成一定绿苗群体载诱导根，也可同时诱导根和芽。 2 拜拜