三聚氰胺含量的不确定度评定.docx

高效液相色谱法测定乳及乳制品中三聚氰胺含量的不确定度评定测量依据：GB/T 22388-2008 原材乳与乳制品中三聚氰胺检测方法。环境条件：温度：（25~30）℃，温度波动≤2℃；湿度：（20~85）％RH。测量仪器设备：高效液相色谱仪（HPLC），配有紫外/二级管阵列检测器；电子天平：分辨力0.1mg；三聚氰胺标准品：CAS 108-75-01，纯度≥99％；单标线容量瓶：10ml、100ml，A级；单标线吸量管：1ml,A级；分度吸量管：5ml,A级；e）辅助设备与试剂：符合GB/T 22388-2008要求。4、被测对象：原料乳与乳制品中三聚氰胺含量。5、测量方法：5.1 样品处理：准确称取M=2g 样品，经离心、净化、固相萃取、吹干、最后流动相定容V=1ml 待测。5.2 标准曲线a) HPLC参考条件：按说明书/标准有关要求设置；b)三聚氰胺储存液：准确称取 100mg三聚氰胺标准品，定容100ml；c)空白试验确保对三聚氰胺响应值无明显影响；d)标准曲线绘制；将三聚氰胺储备液分别稀释到0.8,2.0,20,40,80mg/ml标准工作液，分别进样检测，得到标准曲线的直线方程。5.3定量测定：将待测样品溶液同样进样检测，由其响应值从直线方程可得到样品溶液浓度CP,再计算得样品中三聚氰胺含量X。6、测量结果：6.1 标准储备液配置结果： 称取三聚氰胺标准品 100.5mg，定容100ml，储备液质量浓度为1000μg/ml。6.2 标准工作液配置结果：表1 标准工作溶液配置原标准溶液浓度（μg/ml）移液管体积（ml）移取体积（ml）定容体积（ml）标准工作溶液配置结果（μg/ml）10005410400400521080400111040405510202011102254100.86.3 标准曲线绘制：表2 标准工作液的浓度及相应的峰面积峰面积标准工作液质量浓度（μg/ml）0130.175.982416473287A229.275.182516633294A328.774.782216563283A429.075.282416553288采用最小二乘法拟合，得直线方程未：A=40.989c+3.726,r2=0.99999.6.4 试样检测结果：试样2次平行检测响应峰面积为：1848；1839试样溶液质量浓度为44.9（μg/ml）样品中三聚氰胺含量X：Xxxxxxxxxxxx7、数学模型Xxxxxxxxx 其中：X ------样品中三聚氰胺含量 Cp-----样品溶液质量浓度 V ------样品溶液体积 M -----样品质量 R ------回收率（R=1） r ------测量重复性修正系数（r=1）不确定度来源（鱼刺图） 样品体积V 样品质量M 三聚氰胺含量X 稀释 纯度 标准曲线 标准储备液 重复性r 回收率R 样品溶液浓度 质量 体积输入量的标准不确定度评定9.1 样品溶液质量浓度不准引入的标准不确定度μ（Cp）标准不确定度μ（Cp）由三聚氰胺标准品纯度、称量、定容配置的标准储备液浓度不准引起，还由储备液稀释到标准工作液浓度不准，以及制作拟合直线中随机因素所引起。三聚氰胺标准品纯度不纯引入的标准不确定度μ（Cp1） 三聚氰胺标准品纯度≥99％，不确定度半宽a1=1％，可认为服从均匀分布，所以: μrel(Cp1)=1％√3=0.58％b) 标准储备液中质量不准引入的标准不确定度μ（Cp2） 标准品质量由电子天平称量，电子天平的分辨率为0.1mg,则最大误差限为±1mg，可认 为服从均匀分布，标准品重量为100mg，所以：μrel(Cp2)=1mg/（100mg*√3）=0.58％c）标准储备液体积不准引入的标准不确定度μ（Cp3） 标准储备液体积由100ml,A级单标线容量瓶定容，距JJG196规定，其允差为±0.10ml, 由检定结果表明，可认为服从三角分布，所以：μrel(Cp3)=0.1ml/（100ml*√6）=0.04％d）标准工作液的稀释不准引入的标准不确定度μ（Cp4） 由表1《标准工作液配置》可知，对有代表性20μg/ml工作液，需稀释3次；5ml分度 移液4ml----10ml单标定容-----1ml 单标移液----10ml 单标定容-----5ml分度移5ml-----10ml 单标定容。按JJG196规定，5ml±0.025ml；1ml±0.007ml;10ml±0.020ml。按检定结果 可认为服从三角分布，所以：xxxxxxxxxxxxxe）制作拟合直线中各随机因素引入的标准不确定度μ（Cp5） Xxxxxxxxxxx其中：p----------试