实验八动物细胞融合.pdf
实验八动物细胞融合
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一、实验目的
Ø了解细胞融合的原理
Ø了解细胞融合的原理
Ø初步掌握聚乙二醇法诱导细胞融合的实验
Ø初步掌握聚乙二醇法诱导细胞融合的实验
方法。
方法。
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二、实验原理
细胞融合又称体细胞杂交是指在自然条
件或利用人工方法〔生物的、物理的，化学
的〕，使两个或两个以上的细胞合并成一个
具有双核或多核细胞的过程。利用人工诱导
方法，不仅可以使同种细胞发生融合，而且
可以使不同种间细胞发生融合。
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n种内杂交细胞〔intraspecifichybridcell
n种内杂交细胞〔intraspecifichybridcell
〕:同种细胞融合而成的细胞
〕同种细胞融合而成的细胞
:
n种间杂交细胞〔interspecifichybridcell
n种间杂交细胞〔interspecifichybridcell
〕:不同种的细胞融合而成的细胞
〕不同种的细胞融合而成的细胞
:
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人工诱导细胞融合
人工诱导细胞融合
病毒诱导融合
病毒诱导融合
化学诱导融合
化学诱导融合
电激诱导融合
电激诱导融合
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1、病毒诱导融合
1、病毒诱导融合
n很多种类的病毒能介导细胞融合，如疱疹病毒、
n很多种类的病毒能介导细胞融合，如疱疹病毒、
牛痘病毒、新城鸡瘟病毒、仙台病毒等。
牛痘病毒、新城鸡瘟病毒、仙台病毒等。
n这类病毒的被膜中有融合蛋白〔fusion
n这类病毒的被膜中有融合蛋白〔fusion
protein〕，可介导病毒同宿主细胞融合，也
protein〕，可介导病毒同宿主细胞融合，也
可介导细胞与细胞的融合，因此可以用紫外线
可介导细胞与细胞的融合，因此可以用紫外线
灭活的此类病毒诱导细胞融合。
灭活的此类病毒诱导细胞融合。
n融合率较高，对各种动物细胞都适宜。但是病
n融合率较高，对各种动物细胞都适宜。但是病
毒不稳定，在保存过程中融合活性会降低，并
毒不稳定，在保存过程中融合活性会降低，并
且制备过程比较烦琐。此外，病毒引进细胞后，
且制备过程比较烦琐。此外，病毒引进细胞后，
可能会对细胞的生命活动产生干扰。
可能会对细胞的生命活动产生干扰。
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2、化学诱导融合
2、化学诱导融合
n很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚
n很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚
乙二醇〔PEG〕、二甲亚砜、山梨醇、甘
乙二醇〔PEG〕、二甲亚砜、山梨醇、甘
油、溶血性卵磷脂、磷酸酰丝氨酸等。
油、溶血性卵磷脂、磷酸酰丝氨酸等。
n这类物质导致细胞膜脂分子排列的改变，
n这类物质导致细胞膜脂分子排列的改变，
在去除作用因素之后，质膜恢复原有的
在去除作用因素之后，质膜恢复原有的
有序结构，在恢复过程中由于接口处双
有序结构，在恢复过程中由于接口处双
分子层质膜的相互亲合和外表张力，使
分子层质膜的相互亲合和外表张力，使
相接触的细胞发生融合。
相接触的细胞发生融