阿托品对人视网膜色素上皮细胞D407株表达及分泌TGF-β2的调控.pdf

椭 ‘ ，35(5) Jlttp：／／蚴 _xysⅢ．net 5l8 ．，CentSouthUniv 阿托品对人视网膜色素上皮细胞 D407株 表达及分泌 TGF—p2的调控 谭佳 ，邓志宏 ，刘双珍 (中南大学湘雅 医院眼科 ，长沙 410008) [摘要】 目的：通过观察不同浓度阿托 品联合 10。mol／L卡 巴胆碱干预下 D407细胞表达及分泌 TGF．B2的变化 ，探讨阿托 品对 RPE细胞表达及分泌 TGF—p2的调控作用。方法：常规培养 D407细胞 ， 药物干预前换用无血清培养基培养 ，分为4组 。(1)实验组 (A组)：A。～A 组依 次加入 lO一～1O mol／L阿托品，孵育30min后每组加入 10I5mol／L卡 巴胆碱 ；(2)阴性对照组 (B组)：B1～ 组依次加 入 10～ 10I暑mol／L阿托 品；(3)阳性对照组 (C组 )：加入 10I5mol／L卡 巴胆 碱 ；(4)空 白对 照组 (D 组)：不加药物。干预 24h后采用 RT—PCR，Western印迹及 ELISA法检测细胞胞浆 中 F- mRNA及蛋 白质的表达水平及上清液中TGF—B 的含量。统计学方法采用单因素方差分析。结果 ：实验组 D407细 胞胞浆 F． mRNA和蛋 白质表达水平及上清 中TGF—p：蛋 白质含量均较 阳性对照组低 ，10 otol~L阿 托 品可完全 阻断 10。mol／L卡 巴胆碱上调 TGF—B 表达及分泌 的作用，其效应具有浓度依赖性 (F： 1056．897，1320．170，475．657；P0．001)。阴性对照组 D407细胞胞浆 TGF- mRNA和蛋 白质表达 水平及上清 中TGF—B 蛋 白质含量与空白对照组 比较差异无统计学意义 (P0．05)。结论：阿托 品可有 效抑制卡 巴胆碱促进人 RPE细胞表达及分泌TGF—p：的功能，提示M受体参与介导此过程。 [关键词] 视 网膜色素上皮 ； 转化生长 因子 B2； 卡 巴胆碱 ； 阿托 品 DOI：10．3969／j．issn．1672—7347．20l0．05．0l8 Expression and secretion ofTGF- inhumanretinal pigmentepithelium celllineD407regulatedby atropine TAN Jia，DENG Zhihong，LIU Shuangzhen (DepartmentofOpht~Imology，XiangyaHospital，CentralSouthUniversity，Changsha410008，China) Abstract： 0bjective Toinvestigatetheregulationofatropinetotheexpressionandsecretion ofTGF—B2inretinalpigmentepithelium (RPE)cellsbyobservingthechangesofthoseunderdiffer- enttreatmentsofatropineandcarbacho1．M ethods D407cellswereculturedconventionallyanddi- videdinto4groupsasofllows：(1)Anexperimentalgroup (GroupA)，cellswerepretreatedwith 10一-10一mol／Latropinefor30min，andthentreatedwith10一otol／Lcarbachol；(2)anega— tiv