实验二徒手切片与临时装片的制作讲述.ppt

实验二 徒手切片与临时装片的制作 授课教师：郑 磊 2008.12.04 实验目的与要求 实验器材与用具 显微镜、培养皿、单面刀片、双面刀片、载玻片、盖玻片、毛笔、 吸水纸。 实验材料与试剂 实验材料 新鲜的吊兰茎和叶、芹菜叶柄、黄豆芽，胡萝卜（支持物）。 试剂 1%番红水溶液、 45%醋酸。 实验原理 徒手制片一般指徒手用刀片把新鲜的或固定好的植物材料切成薄片，不经染色或经简单染色后用水封片制成临时制片的方法。 此制片法主要优点是：（1）能及时观察研究植物生活组织的结构和天然色彩；（2）方法及用具简单，不需切片机等机械设备，短时间即可完成。 主要缺点是：（1）对于微小、柔软、水分过多以及坚硬的材料，难以用徒手切成薄片；（2）不能制成连续的切片；（3）对于操作不熟练者，往往难以切成厚薄均匀和完整的切片。 实验方法 材料的准备和修整 将植物茎切成2~3cm长的小段，并将其切面削平； 若为质地较软而薄的材料，如叶片，可沿主脉两侧切成宽5~6mm、长1~1.5cm的小块，夹在支持物中进行切片。 支持物通常为萝卜、胡萝卜、马铃薯、通心草等。先将支持物切成高3~5cm、长、宽0.5cm的立方体小块，将其中部纵切一缝，然后将修整好的材料夹在其中。 切片 切片前在培养皿内盛放适量清水。 以左手拇指、食指、中指捏住材料，拇指应低于食指，以免切伤手指，材料高出食指2~3mm。 切片前，用水润湿刀片，以减少切片阻力。 右手执刀，将刀片平放在左手食指上，刀口朝内，刀面与材料断面平行，然后以均匀快捷的动作自左前方向右后方以臂力带动刀片水平切割，不要用腕力。同时还要注意，切时动作要迅速，材料一次切下，切忌停顿或拉锯式切割。 切下数片后，用湿毛笔轻轻将薄片移入清水中，防止材料萎蔫。 染色与镜检 若要观察植物组织的天然色彩：挑选薄而透明、平整的切片，放在载玻片上，水封，制成临时装片。 若想染色以观察更清楚的切片：采用单染色，即用1%番红水溶液染色3~5min，用蒸馏水洗去浮色，水封，镜检。 拿材料的手势 任务与要求 1.制作一张合格的徒手切片。 2.在制作徒手切片的过程中，你遇到了哪些问题，如何避免？ * * LOGO 熟练掌握徒手切片技术，能够切出只有一层细胞的切片。 观察材料 剃刀 双面刀片 胡萝卜 木髓 切取标本 切取的标本 擦拭载玻片 滴水 放置标本 加盖盖玻片 叶的横切 玉米茎横切 南瓜茎横切 南瓜茎纵切 * 【图片说明】 一面接触水滴慢慢加盖盖玻片，以免产生气泡。 * *